2, C

Imunitní proteiny
Daniela Plánská
[email protected]
Základní struktura imunoglobulinů
(Ig)
• Glykoproteiny
• 2 těžké (H) řetězce
• 4-5 strukturních domén dle třídy Ig
» Doména na N konci – variabilní (VH)
» Zbylé - konstantní (CH 1, CH 2, CH 3..)
» Spojení – polypeptidové řetězce
• Molekulová hmotnost – 50-75 kDa
• Spojení – 2 disulfidické můstky =
= pantová oblast
» Stabilizace molekuly
Základní struktura imunoglobulinů
(Ig)
• 2 lehké (L) řetězce
• 2 domény
» Doména na N konci – variabilní (VL)
» Zbylá - konstantní (CL )
• Molekulová hmotnost – 25 kDa
• Spojení s těžkými každý
1 disulfidickým můstkem
» Stabilizace molekuly
• VL+ VH = vazebné místo
Fragmenty molekuly
imunoglobulinu
• Vhodné proteolytické štěpení → fragmenty
• Papain → 2 x Fab, Fc
• Fab fragment
• 1 vazebné místo pro antigen – Fv fragment
» Nekovalentně asociované
variabilní domény
• Fc fragment
• Vazba na Fc receptory fagocytů
• Vazba komplementového proteinu C1
Další strukturní vlastnosti
imunoglobulinu
• IgM i IgA
• Více základních imunoglobulinových podjednotek
• Spojení – J řetězec
• Slizniční IgA
• Více základních imunolgobulinových podjednotek
• Spojení
» J řetězec
» Sekreční komponenta
Typy řetězců imunoglobulinů
• Lehké řetězce
• κ, λ
• Kódovány odlišnými geny
• Podobné strukturní a funkční vlastnosti
• Těžké řetězce
• μ, δ, γ, α, ε
» γ subtypy – γ1-4
» α subtypy – α1-2
• Geny uloženy tandemově na jednom chromozomu
Specificka imunoglobulinových
izotypů
• IgM, IgD
• 4 konstantní domény
• IgG1-IgG4 , IgA1-IgA2, IgE
• 3 konstantní domény
Antigen
Antigen je látka, kterou imunitní systém
rozpoznává a reaguje na ni
•
•
•
•
Jakékoliv chemické struktury
Epitop – rozeznáván imunitními receptory
Autoantigen
Exoantigen
Interakce antigen-protilátka
• Epitop – část antigenu
• rozeznáván imunitními receptory –
– reakce s protilátkou
• Samotná interakce antigen-protilátka
• Nekovalentní komplexy
»
»
»
»
Iontové síly
Vodíkové můstky
Van der Waalsovy síly
Hydrofóbní interakce
Vazba antigen-protilátka
• Reverzibilní
• Vznik x rozpad → asociační x disociační konstanta
• ↑asociační konstanta = ↑afinita (ochota látek spolu
reagovat)
• Avidita = síla interakce polyvalentní
protilátky s polyvalentním antigenem
• Imunokomplexy antigen + protilátka +
(často) komplementové
složky
Fc receptory (FcR)
• Vazba Fc částí imunoglobulinových
molekul
• FcαR, FcγR, FcεR, FcRn, Poly-IgR
• Význam při endocytóze a fagocytóze
částic opsonizovaných protilátkami
• Význam při regulaci protilátkové odpovědi
Převzato z:
http://www.profelis.org/amc/vorlesungen/i
mmunologie/komplementsystem.html
Převzato z: http://openlearn.open.ac.uk/mod/oucontent/view.php?id=398852&section=2.6
Převzato z: http://www.dreamstime.com/royalty-free-stock-imagesmast-cell-degranulation-image13078689
Imunoglobuliny – Základní
funkce
• Neutralizace
• Blokace aktivity toxinů, virů, mikroorganismů
• Opsonizace
• Pohlcení fagocyty
• Aktivace destrukčních mechanizmů fagocytů
• Napadení NK buňkami
• Aktivace komplementu
• Komplement neaktivují IgG4, IgA
Neutralizace
Převzato z: http://www.virology.ws/2010/11/11/antibodies-neutralize-viral-infectivity-inside-cells/
Opsonizace
Převzato z: http://faculty.ccbcmd.edu/courses/bio141/lecguide/unit4/innate/antibody/u3fg18b.html
Aktivace komplementu
Převzato z: http://quizlet.com/5290475/chapter-17-adaptive-immunity-flash-cards/
Hybridomová technologie
Komerční výroba protilátek
Užití principu vazby
protilátky s antigenem
antigen + protilátka
Imunokomplex
antigen-protilátka
Detekce buněk, struktur, molekul
pomocí protilátek
Komerční výroba protilátek
↓
→
→
Příklad využití protilátek v
diagnostice
Nepřímá fluorescenční analýza
Fluorescence je emise
záření fluorescenční
látkou, která byla
předtím excitována
Mikroskopická fluorescenční
analýza – Detekce autoprotilátek
Obr.1 Opičí jícen - IgA protilátky proti
endomyziu
Obr.2 Crithidia luciliae - protilátky proti dsDNA
A
B
C
< cytoplazmatic staining
Obr.3 Lidské granulocyty - různá specifita protilátek
proti granulocytům
Obr.4 Hep-2 buňky- protilátky proti a) jaderným strukturám b)
mitochondriím c) aktinu
Komplementový systém
Převzato z:
http://www.britannica.com/EBchecked/me
dia/17664/Pathways-of-complementactivation-The-main-function-ofcomplement-proteins
Základní funkce komplementu
• Opsonizace
• Chemotaxe
• Osmotická lýza
» http://www.youtube.com/watch?v=7VQU28itVVw
Komplementové receptory (CR)
• Vazba fragmentů komplementových složek
• Význam při:
• Chemotaxi
• Fagocytóze
• Aktivaci
imunokompetentních buněk
• Zachycování a odstraňování imunokomplexů
• Ochraně vlastních buněk před účinky komplementu
Převzato z:
http://www.springerimages.com/Images/MedicineA
ndPublicHealth/5-10.1186_1465-9921-6-19-1
Alternativní cesta aktivace
komplementu
http://www.experiencefestival.com/wp/video
s/alternative-pathway-complimentsystem/PMPsbX3oOGo
Membranolytický komplex (MAC)
http://wn.com/Complement_Cascade__Mem
brane_Attack_Complex
Klasická cesta aktivace
komplementu
http://www.dnatube.com/video/2328/TheComplement-System
Lektinová cesta aktivace
komplementu
http://vimeo.com/35665728 4:24
Komplementový systém shrnutí
http://www.youtube.com/watch?v=2TmONz
V-rdw
Děkuji za pozornost