Úloha 6: Izolace dihydrosanguinarinu

Úloha 6: Izolace dihydrosanguinarinu
(podrobněji popsáno ve Vičar, J., Soural, M., Hlaváč, J. Chem. Listy 104, 51–53 (2010).
Úkol:
1. Proveďte redukci extraktu z Macleaya cordata.
2. Izolujte dihydrosaguinarin pomocí sloupcové chromatgrafie na silikagelu.
Postup:
1. 100 mg extraktu rzpusťte v 40 ml methanolu.
2. Za míchání při laboratorní teplotě postupně přidejte 120 mg tetrahydridoboritanu
sodného (ve třech dávkách).
3. Po ukončení reakce (přestane se uvolňovat vodík) odpařte na rotační vakuové odparce.
4. Odparek rozpusťte ve 40 ml chloroformu a vytřepejte vodou v děličce.
5. Chloroform oddělte, vysušte síranem sodným a znovu odpařte.
6. Odparek rozpusťte pro separaci. Rozpusťte v co nejmenším objemu chlorformu (cca 1
ml).
7. Roztok naneste na připravenou kolonu naplněnou silikagelem. Jako mobilní fázi
použijte chloroform.
8. Jímejte eluát do odměrného válce po cca 5 ml a přelijte ho do popsané zkumavky.
Odeberte 15 frakcí. Dihydrosanguinarin by měl být eluován z kolony jako první látka.
9. Z každé frakce proveďte TLC analýzu na silikagelové destičce. Jako mobilní fázi
použijte směs chloroform:ethylacetát (20:1).
10. Frakce, které podle TLC obsahují pouze dihydrosanguinarin, slijte do zvážené baňky s
kulatým dnem a odpařte. Zvažte baňku s odparkem a určete výtěžek separace.
11. Rozpusťte 1 ml odparku v 1 ml methanolu a tento roztok analyzujte pomocí LC-MS. Z
poměru ploch píků přítomných v chromatogramu (PDA) určete čistotu.
Protokol:
Vysvětlete, proč byly použity jiné mobilní fáze pro sloupcovou a pro tenkovrstvou
chromatografii.
Jaká byla čistota získaného dihydrosanguinarinu a jaký byl výtěžek separace.
Vyfoťte nebo překreslete TLC desku s analýzami jednotlivých frakcí, kde se začíná objevovat
skvrna dihydrocheletrythrinu.