Sliny prasat jako vhod ný diagnosti ckÝ materiál

Sliny prasat jako vhod ný diagnosti ckÝ materiál

L ]^.^^'{{ř.|'
{ -',iř.+r r u J P UodářskáZvířata
Hos
uor)No
zviloLo
prasatjako vhodný
Sliny
vhod ný
Sliny prasatjako
diagnostickýmateriál
diagnostickÝ materiál-praktickézkušenosti
praktickézkušenosti
T.
T. JIRÁSEK,“P.
JtRÁSEK,. P.VÁCLAVEK2
VÁCLAVEK'
'MEVET spol. s r.
'MEVETspol.S
r. o.,
o., Praha
Praha
,státní v
2Státní
eterinární
ústavJihlava
veterinární
ústavJihIava
SOUHRN
SOUHRN
.
l
prakti<kézkušenosti.
Jirásek
ateriál-- praktické
Jirásek T.,
T.,VáclavekP.
VácIavek P.Slinyprasatjakovhodnýdiagnostický
Sliny prasat jako vhodný diagnosti<ký m
materiá!
zkušenosti.
Veterinářství
Veteriná řství2014;64:714-718.
2o14;64..7
14-7 18.
p o s I e d n í c hletechje
V
V posledních
pra| e t e c hj e Vv laboratorní
| a b o r a t o r nveterinární
í V e t e r i n á rdiagnostice
dniía g n o s t i c estálečastějivyužívánvzorekslin
s t á | eč a s t ě jvi y u ž í v á nv z o r e k s | i nprapraxi se
potvrdi|o,že
sat.V
ze využítk
sat. V praxi
se potvrdilo,
že Sliny,resp.
s|iny,resp. ústnítekutiny,
ústnítekutiny,l|ze
vyuŽítk diagnostice
diagnostice některých
některých závažných
závažných
jinými
p r a s a t .M e z i jinými
onemocnění,
o n e m o c n ě n í ,která
k t e r á majívlivjak
m a j í v | i vj a k na
n a zdraví,tak
z d r a v í t, a k na
n a rentabilitu
r e n t a b i l i t ukomerčního
k o m e r č n í hchovu
coh o v u prasat.Mezi
p o r c i n n í h oreprodukčního
se
v z o r e k s | i n osvědčilV
s e vzorekslin
o s v ě d Č iv| diagnostice
d i a g n o s t i c eporcinního
r e p r o d u k č n í haao respiračního
r e s p i r a č n í hsyndromu(PRRS),
soy n d r o m u ( P R R S ) ,
j a k o vzorek
( P c V 2 ) .Sliny
p o r c i n n í h ocirkovìrutypu
viru
potenciá|
v i r u chřipky(SIV)
c h ř i p k y ( S | V )aa porcinního
c i r k o v i r u t y p u 22 (PCV2).
5 | i n yjako
v z o r e k mají
m a j í široký
š i r o k ýpotenciál
práce na vývojinovýchtestůa
prasat dá|e probíaa prácena
távajícíchtestůk
zorkuslin
vývoji nových testůa na
probi
na validaci
va|idacisstávajících
testůk využití
využitívvzorku
s|in prasatdále
j e j i c h v y š e t ř e n ím
j e d n o d u c h o u ,neinvazivní
A hají.
h a j í .Odběrvzorkůslin
o d b ě r v z o r k ůs | i n aa jejichvyšetření
m ají
a j ísvá
s v á specifika.
s p e c i f i k a J.J eedná
d n á se
s e oo jednoduchou,
neinvazivní
p r a s a t .S m ě s n ý v z o r e k j e reprezentativní
pí r o
technikuodběrudiagnostickěho
t e c h n i k u o d b ě r u d i a g n o s t i c k é h ovv zorku,bez
z o r k u , b e z stresu
s t r e s u prasat.Směsnývzorekje
r e p r e z e n t a t i v npro
p o p u | a c i prasat
p r a s a t aa lze
p r o cenově
danou
d a n o u populaci
| z e ho
h o využít
v y u Ž í t pro
c e n o v ě výhodný
v ý h o d n ý monitoringvybranýchchorob.
monitoring vybraných chorob.
Považujeme
aši veterinární
PovaŽujemeza
za nutně
nutné informovat
informovat nnaši
Veterinárníaa chovatelskou
chovate|skouobec
technice odběru vzorkŮ,
obec oo techniceodběruvzorků,
ale
a | e ii oo možnostech,
m o Ž n o s t e c h benefitech
b
, e n e f i t e c haa limitech
| i m i t e c htohotozpůsobuvzorkování
t o h o t o z p ů s o b uv z o r k o v á n íaa vyšetření.
vyšetření.
SUMMARY
SUMMARY
- practical
JirásekT.,
practical
Jirásek T., VáclavekP.
Vác|avek P. PorcineOral
Porcine oral fluidsamplesas
fluid samples as appropriate
appropriate diagnostic
material diagnostic material
experience.
experience. Veterinářství
Veteri ná řství 2014;64:714-718.
2o1 4;64:714-7 1 8.
Porcineoral
sed in veterinary
n recentyears.ln
Porcine oral fluidsampleis
fluid sample is increasingly
increasingly u
used
veterinary laboratory
laboratory diagnostics
diagnostics iin
recent years. In
practice was confirmed
practiceWas
ral fluidscan
confirmed that
that saliva,respectively
saliva, respectively o
fluids can be used
oral
used to diagnosecertainserious
diagnose certain serious
profitability of
pig farming.
diseases
mongothers,
he
diseases thataffectboththe
that affect both the healthand
health and the
the profitability
of commercial
farming. A
Among
others, tthe
commercial pig
proved well
saliva
porcine reproductive and
saliva sample
sample has proved
well in the
the diagnosisof
diagnosis of porcinereproductive
respiratory syndrome
and respiratory
syndrome
(PRRS), influenzavirus
(SlV), and
(PCV2). Saliva
(PRRS),
porcine circovirus type
influenza virus (SIV),
and porcinecircovirus
type 2 (PCV2).
Saliva as a Sample
sample have
have huge
huge
potential a
potential
nd the
and
the Work
work on
the development
on the
development of
of new
new testsas
tests as Well
well as the
the validation
validation of
of existingteststo
existing tests to
p i g s c o n t i n u e s . Samplingand
use
u s e oralfluidof
o r a l f l u i d o f pigscontinues.
S a m p l i n g a n d examination
examination o
o ff salivahavetheirown
s a l i v a h a v e t h e i r o w n characteristics.
c h a r a c t e r i s t i c s It
l.t is
is
l a simple,non-invasive
p i g s . A pooled
pooled
s i m p l e , n o n - i n v a s i v e diagnostic
d i a g n o s t i c samplecollection
s a m p l e c o l l e c t i o n technique,
technique, W
w i ithoutany
t h o u t a n y stressof
s t r e s s o f pigs.
pigs and can
sampleis
sample is representative
representative for
for certainpopulation
certain population of
of pigsand
used for cost effective monitoring
monitoring of
can be usedforcosteffective
selecteddiseases.We
selected diseases. We considerit
consider it necessaryto
necessary to inform
inform our
our veterinary
veterinary and
and breedingcommunity
breeding community of
of
Samplingtechnique,
s a m p l i n g t e c h n i q u e , buut
t also
a l s o the
t h e opportunities,
o p p o r t u n i t i e s , benefitsand
b e n e f i t s a n d limitations
l i m i t a t i o n s of
o f this
t h i s methodof
m e t h o d o f Sampling
sampling
and
a n d examination.
examination.
t
Úvod
UVOO
prasat,resp.jejich ústnítekutiny,sse
Sliny
e nabízí
5|inyprasat,resp.jejichústnítekutiny,
nabízí
jako vhodnýbiologický
jako
diavhodný bio|ogickýmateriálk
materiá|k laboratorní
|aboratorní
diagnosticeněkterýchvýznamnýchonemocnění.
e
gnostice některýchvýznamnýchonemocnění.Z
Ze
slin
prasatje možnájak
přÍmádetekcepatogenů,
možnájak přímá
slin prasatje
detekce patogenů,
714
714
jako např.
tak
proti|átek proti
proti nim
tak ii specifických
specifických protilátek
nim jako
např'
PRRSVl*2a
PRRSV],,aPCV22,viruschřipkyprasat5aErysipelothrix
PCV2,,virus chřipky prasat5a Erysipelothrix
rhusiopathíaeó.
rhusiopathiaeó. Ve slináchmůžemerovněždetekos|inách můŽeme rovněŽ detexovat
pos|ední výzkum se zaměřuje
vat antibiotika?
antibiotika7 a poslednívýzkum
zaměřuje
VETERINÁŘSTVÍ
99l2o14
/2014
VETERINÁŘsTví
J ^ - ^ ^ A : Y - t ,: , - , , i y - + H
Z
vi l ío řL ao t a
r r uo
) psup
u dor )dn á
o řsk
z vá
horečko
m
N
M
l t kou
s k oh
uo r e č kuo((B
uBru
r uceclleal m
l aeelIitensti).,
i t e n s í sN
) .yn
2y níjíso
j suovvy
uyužív
u ž íáváMaa|ts
virus,
nnyyttesty
e s t yzzee ss|in
l i nlIidí
i d ínnapř.
a p ř nna
. a sspaIničky,
p a l n i č kH
y I,V ,E
p s t e i n - B va
irrru s ,
H|V'
Epstein-Barr
M.
h
e p a t i t i d((A'
uA , BB', C
) , ppříušnice,
ř í u š n i c ezzarděnky,
,a r d ě n k yM
, . ttuberculosis,
uberculosis,
hepatitidu
c),
parvovirus,
přípaherpesvirus
některých
S A R S ,p
a r v o v i r uh
se, r p e s v i r u
aa sdda|ší.2,9
a l š í . 2 “V
V9 n
ě k t e r ý cp
hř í p a 5AR5,
H|ý
vyvinuty
d
e c h jjako
,a k onnapř.
a p ř .H
I V ,b
y l yv
y v i n u tii yttzv.
z v .rrych|é
y c h l éttesty
e s t y(10-20
(10-20
dech,
by|y
humánní
medicíně
m
i n . )Da|ší
D. a l š b
í i o m a r k evve
r eyss|inách
l i n á cjjsou
hs o uVv h
u m á n nm
í edicíně
min.).
biomarkery
h|avy
vvyuŽívány
y u ž í v á nnnapř.
ya p ř .Vv d
i a g n o s t i ckkarcinomů
ea r c i n o m h
ů l a v yaa kkrku,
rku,
diagnostice
periodontitis,
detekci
kk d
i a g n o s t i cp
ee r i o d o n t i tkki sd
, e t e k czzubního
i u b n í h okkazu,
a z u ,aale
le
diagnostice
drog
metabo|itů
ii kk m
onitorind
g
ruo gaa jjejich
e j i c hm
e t a b o l i ((např.
t nůa p řTTHC).,
.HC).9
monitoringu
V
c
y |l yys
V ee vv eetteerri ni ná ránrd
dínii aíaggnnoos s
t itcieb
b ye
s Il iinnyjyajkaokd
doiiaaggnnoos tsi tcikcýk ý
má|o
Ve
vvzorek
zored
kdoposud
o p o s u vve|mi
de l m m
i á l ovvyuŽívané.
y u ž í v a nV
ée. vvýkrmu
ý k r m usskotu
kotu
Sliny,či
Sliny,čiústnítekutiny?
ústní
tekutiny?
pouŽívány
Escherichia
o157:H7
b
yly p
oužívány
kk d
e t e k c iE
s c h e r í c h iccoli
ao / I ' O
157:H7
by|y
detekci
diagnostice
aa S
a l m o n e lssp.12,
l pa . 12, utJ kkoček
o č e kkk d
i a g n o s t i vviru
c ier ukkočičí
o č i člleuíe u Salmonella
přepojem
moŽným
e m i eaa e
x p e r i m e n t á ttéž
l én žV
ěv ssouvis|osti
o u v i s l o sss tm
i o ž n ý mp
řeexperimentá|ně
B
ě ž n ěu
žívanp
ý o j e m,,,s|iny,,
, s l i n yjjee
” Vv ttěchto
ě c h t ossouvisIostech
o u v i s l o s t e c h kkemie
Běžně
užívaný
pojem
např.
viru
osemn
ěkterýcc
h
h o r o bjjako
ako n
a p ř .v
i r u vvztek|iny.2
ztekliny.2
ústní
nosem
některých
chorob
n
e s p r á v naaým
ě lb
eu
ž í v asspíše
t p í š ep
o j e mú
s t n ttekutiny
íekutiny n
nesprávný
mě|
byy sse
uŽívat
prasat
výskyt
experimentá|ně
r a s ab
t y lvVe
e ss|inách
linách
e
xperimentáp
lpotvrzen
noět v r z eV
ný s k y t
v|astních
Up
by|
((z
Za
n g lo
. r a ffluids).
l l u i d s )Ú
. s t n ttekutiny
í e k u t i njjsou
sy o uss|oženy
l o ž e nZzyv
lastních U
ang|.
oral
Ústní
po
proti|átek
pak
streptococcus
p e c i f i c k ý cp
hr o t i l á t ep
ko iinfekci
n f e k cS
i t r e p t o c o c c ssk.
uks. EE
ssIin,
l i n ,k
t e r jsou
é j s ossekretem
ue k r e t e m
sslinných
l i n n ý cžž|áz,
hl á z d
,dá|e
á l ep
a kzzee ssIizničl i z n i č - sspecifických
které
pleuropneumoniae
podgn
1 9 7 3 )A
, c t i n o b a c í lp
l ul e
s u r o p n e u m o n((l993)
i 1a9e9 3 )aa p
odActinobacillus
n
n íí hh o
ott rr aannssuuddá táutcc,uee,rrvvi ki ká á
| nlg
íiiínnggi vi vá |ánltíne kí tuet iknuyb
bt, iuunnnyěě,ččnnéé-- ((1973),
potravy
e d n o t kBByccholeratoxinu
h o l e r a t o x i((2004).'z
n2 u
004).2
h
e t r i t ue
,n z y m ůa
, n t i s e p t i c k ýl|átek'
ác the kzzbytků
, b y t k ůp
o t r a v y jjednotky
hoo d
enzymů,
antiseptických
detritu,
pak
případě
aa b
a k t e r i í . 9p
Vř í p a d iinfekce
ěn f e k c p
e a kú
s t n ttekutiny
í e k u t i no
yb s a h u j í
ústní
obsahují
bakterií.9V
proti|átky
patogeny
oběhové
p
a t o g e n ((|oká|ní
yl o k á l nčči
íi zz o
b ě h o v éssoustavy)
o u s t a v yaa) p
rotilátky
moŽností
možnosti
l|aboratorní
aboratorní
Současné
patogeny
můžeme
((|oká|ní
l o k á l nčči
íi ssérové).
é r o v é )JJako
.a k ol|oká|ní
o k á l np
í a t o g e nzzde
yd e m
ů ž e m e Současné
prasat,
moru
d
e t e k o v an
ta p ř .vvirus
i r u skk|asického
l a s i c k é hm
o o r up
r a s a tkkterý
, t e r ýssee
např.
detekovat
prasat
diagnostiky
ze
diagnostiky
ze slin
slinprasat
proti|átky
pocházejí
rrep|ikuje
e p l i k u jVVe ttonsi|ách.2
o n s i l á c h .L
2o k á l n p
í r o t i l á t kp
yo c h á z e zze
j íe
Loká|ní
prasat
viru
např.
U p
r a s a tb
y l ao
v ě ř e n ad
i a g n o s t i kzzea
e ss|in
linn
a p ř .v
iru
MALT/
by|a
ověřena
diagnostika
ss|inných
l i n n ý cžž|áz
hl á z((B
Bb
u ň k yaa) l|ymfoidní
y m f o i d ttkáně
nkíá n ě((B
Bb
u ň k yM
ALT/
buňky)
buňky
pak
pomocí
Aujeszkyho
choroby
M P I 3 ,vviru
i r u KKMP,
M F 1 , vviru
iruS
L A K ,vviru
i r uA
u j e s z k y hc
oh o r o b y
AMP13,
SLAK,
D
A L T )Z
r v esse
ep
a kd
l i nd
o s t á v ap
j ío m o css|izničního
ílizničního A
doo ss|in
dostávají
DALT).
Z. kkrve
a pp řř..vv ii rr uussP
p aattooggeen n
yy
nejčastější
využití
i r uV
e z i k u l á rsstomatitidy.
ntío m a t i t i dO
yv. š e mn
e j č a s t ě jV
š yí u ž i t í
PR
veziku|ární
ovšem
éj ii nné
tt rr aannssuuddá táutrruů
ů zz nn éj
ép
(( nn a
RRRSS)),,]“r a vviru
přiř id
praxi
viru
vzorek
detekci
n
a c h á zVí p
r a xv
i z o r e sslin
k l i np
e t e k cvviru
ii r uPPRRS.]o,]a'r8
R R S , l ° * l 4v
“ Ii8r u
protilátky
nacházív
ssérové
é r o v ép
rotilátk
((|gM
l yg l V ,'I l|gG),
gG)a
,antibiotika,
n t i b i o t i klléky
éa k, yaapod.,,,
pod.2*9
přímým
průkazem
cchřipky5
h ř i p k ya5 P
C V - 2 2 3 5a, ttoo jjak
a kp
ř í m ý mp
růkazem
vviru,
i r u ,ttak
ak
Pcv-22,15,
pcroti
prů
vyyužití
Nej
p
r ůkazem
kazem
specifických
p e c i f i c k ýp
rho t|áte
i l á k.
t eN
ke. ijsté
i s t zzatím
éa t í mjjee v
užití
Historie
sslin
linVv diagnostice
VyuŽití
HistorieVyužití
diagnostice
přímé
ss|in
link p
ř í m éd
e t e k cM
i y c o p l a s mh
ay o p n e u m o n íaa ettoo
Mycoplasma
hyopneumoniae
detekci
kkvů|i
v ů l im
o ž n ý mffa|ešně
a l e š n ěn
egativním
vvýs|edkům
ýsledkům
V ttestu
estu
negativním
moŽným
přímé
diagnostice
C R . JJee zznámo,
n á m o ,žŽee k iintravitá|ní
n t r a v i t á lp
nří í m éd
iagnostice
PCR.
V
y u ž i tss|in
í l i nVv d
i a g n o s t i cn
ee n ín
o v éVv o
b l a s th
i umánní P
není
nové
ob|asti
humánní
Yyužití
diagnostice
proti|átek
hIuboI / l y c o p l a sh
myao p n emoniaejsou
u m o n i a e jvvhodnější
shooud n ě j sspíše
špí í š eh
lubohyopneu
m
e d i c í n yP
?ř í t o m n o ssspecifických
tp e c i f i c k ý cp
hr o t i l á t evve
ke ss|inách
l i n á c h /Mycoplasma
Přítomnost
medicíny.9
přímý
prŮkazActinobacillus
kké
éV
ý t ěr yaa lIaváŽe.
a v á ž eL
.imitm
y á ii p
ř í m ýp
r ůk a zA c t í n o b a c í l l u s
poprvé
výtěry
Limity
má
bby|a
y l ap
o p r v épprokázána
r o k á z á njjižv
ai žV rroce
o c e11909
9 0 9Vv ssouvis|osti
o u v i s l o ssst ttzv.
iz v .
pleuropneumoniae
neboť
by|y
p
l e u r o p n e u m o nzze
ie
a ess|in,
lin,n
e b o ťb
y l y zzaznamenány
aznamenány
TTesty
e s t yk ddiagnostice
i a g n o s t i cchorob
eh o r o bZzee sslin
l i npprasat,
rasat,
poo iinfekpozitivní
pouze
p
o z i t i v vn
ýí s l e d kVyttestu
e s t uP
CRp
o u z e1
. - 7 .d
enp
nfekPCR
1._7.
den
výs|edky
SVÚ
kkteré
t e r ébbyly
y l yzzavedeny
a v e d e nnna
ya ooddětenívirologie
d d ě l e nVíi r o l o g iSV
e ÚJJihlava
ihlava
prasat
pravděvyuŽití
bude
cci.16
i . l 5D
a l š vvýzkum
í ý z k u mv
y u ž i vtvzorků
íz o r k ůssIin
l i np
r a s ab
t u d ep
ravděDa|ší
podobně
l
P
růkaz
I
Mycoplasma
hyorhip
odobně
n
á s l e d o v Vva td
iagnostiM
c
ey c o p l a s mh
ay o r h í Průkaz
nás|edovat
diagnostice
. P
atogen v
iru/protiD
Diagnosticl<yi
i a g n o s t i cttest
keys t
Patogen
viru/protinnis,
í s ,LLawsonia
a v v s o n íintracellularis,
an t r a c e l l u l avviru
r i rsuP
, PED
E D((porcinní
porcine
n
p
í idemicepidemic|
llátek
átek
parasuis
kkáá d
i a r r h o e aS
)a, l m o n e lssp.,
l pa. ,H
a e m o p h i /p
u as r a s u ías vvee
Haemophilus
diarrhoea),
9almonella
ss|edová
l e d o vnáín
A
T
í B ((monitoring,
m o n i t o r i no
gd,bou
b o urává
r á vn íáa
npío d . ) .
ATB
od
apod.'.
RT
A kkonvenční
o n v e n č nR
íT PPCR
CR
V ttabu|ce
abulce
jjsou
souu
v e d e n yttesty
e s t yu
r č e n ékk d
iagnostice
uvedeny
určené
diagnostice
prasat,
oddě|ení
cchorob
horob
zzee ss|in
l i nuu p
r a s a tkkteré
, t e r éb
y l yzzavedeny
a v e d e nnna
ya o
ddělení
byly
V
n
nested
e s t e dPPCR
CR
v ii rr uu ss
V
i r o l o g iS
eV Ú JJih|ava,
i h l a v ab
, y l yzzde
d evvaIidovány
a l i d o v á nVv ym
ezinárodmezinárodviro|ogie
sVÚ
by|y
n
í m kkruhovém
ruhovém
ttestu
e s t ua jjsou
s o uzzde
d ejjiŽ
i žttéměř
éměd
řdva
v a rroky
o k yvvyuŽíyužíním
PRRSV
PRRSV
v áánnyy k r uutti ni nn n
í iiaaggnno sotsi ctei .c A
. yy s e zz aabbr ár náin| oi l foaa|l eeššnněě
íd
Aebb
q R TP C R
qRTPcR
pů
n eegga a
v ýýss| leed d
km
ům
CRR t eesst yt yu
č eennéép
ů vvooddn ěn ě
ků
, P,C
u rrč
t i tvinvín
mí m
novou
kd
e t e k czze
ie sséra
é r aččii ttkání
kánb
í y l on
u t n ov
alidova
nnaat n
ovou
by|o
nutno
va|idovat
detekci
_
,
ELISAıDE><><PRRS
E L I S AI D E X XP R R S
proti|átky
p'°“'aÍ'<V
ovaı
O r a lFınınżıflAh
F l u i d sA b tefl
test
m
a t r i c ttj.
i j, . ss|iny.r5,r7
l i n y . I 5 ›E
I 7L I S Attesty
e s t yb
y l yV
ě t š i n o zzásadními
uá s a d n í m i
EL|SA
by|y
většinou
matrici,
proti|átek
přizpůsobeny
např.
kkroky
r o k yp
ř i z p ů s o b enna
nayd
e t e k cp
i r o t i l á t ezzeek ss|in
l i n-- n
apř.
detekci
R ee aalT| -i T
vv ii rr u
uss
gq R
PeC
mi emP
C RR
o
p t i m a l i z o v ařředění
n
ed
é ě nvvzorku,
í z o r k uzzměna
,m ě n aVv iinkubaci
n k u b a cvvzorkŮ,
iz o r k ů ,
optimaIizované
Z
měěnna ak oonnj uj ug ágtá
* l88
u tauppoodd. .r l' 1
zm
Mono
p<;\/_2
sERELIsA®
S E R E L I S APc\/2Ah
' P C VA2b iviønø
PCV-2
B l o c k l n gL L I S A s e m i k v a n L i i
.,
ifl0€mngıaJsAz-Senflkvannprotilátky
S yy nnbbiioottiic+
+
A
D r o t l l a t k y tt a
csslMVeI er irai a| /| /
a tt iivvnn((ííS
Postupodběrua
vzorku
Postupodběrua zpracování
Zpracovánívzorku
LDA22)
I
LDA22)
prasat
U p
docí|íme
ttaké
a k énnaa d
e t e k cp
i r o t e i na
ůk u t nffáze.8
íá z e ?U
r a s ad
t ocílíme
detekci
oroteinů
akutní
umístíme
absorpční
zzískání
í s k á nv
í h o d n é hvvzorku
oz o r k uss|in
l i nttak,
a k ,žže
eu
m í s t í ma
eb s o r p č n í
vhodného
ponecháme
provaz,
ho
m
a t e r i áttj.
lj,. b
a v l n ě np
ýr o v a zd
, o kkotce
o t c ea p
o n e c h á mh
eo
materiá|,
bav|něný
do
u
r č i t od
u o b uzzvířata
v í ř a t žŽvýkat.Tato
av ý k a T
t .a t ottechnika
e c h n i kjjea
e sstá|e
t á l eččastější
astější
určitou
dobu
je,
praxí
p
r a x ívvee vVeterinární
e t e r i n á rm
n íe d i c í n ěH
. l a v n vvýhodou
í ý h o d o ju
e , žŽee ssee
medicíně.
H|avní
d udcuh c
o uh,onuee,i innv v
jj eeddnná áo jj eeddnno o
a zai z
v ni vítneecíchhn n
i kiukouddbběě
r ur ud iiaa. pro
gnostického
g
nostickéh
vvzorku,
zoo r k ukkterý
, t e r ýjjee zzároveň
ároveň
rreprezentativní
e p r e z e n t a t ip
vrnoí
pro
popu|aci
prasat
hoo v
využít
výhodd
a n o up
o p u l a cp
ir a s aat l|ze
z eh
y u ž íp
t r occenově
e n o v ěv
ýhoddanou
n
o n i t o r i nvvybraných
g
y b r a n ý ccchorob.
hh o r o b .
nýý m
monitoring
Sstv
IV
V i rUuSs
V
E T E R I N A Ř S T9
V/ 2Í 0 1 4
VETERlNÁŘsTví
9/2o14
B
RT
T PPCR
CR
pro
N
e j v h o d n ě j šm
ím
a t e r i á l ep
mr oo
d b ě vvzorku
r z o r k uss|in
l i njej e
b
avlNejvhodnějším
materiá|em
odběr
bav|provaz
n
ě n ýp
r o v a z((viz
v i zoobr.
b r .11).
). D
o b ř ea
b s o r b u jae ssnadno
n a d n oZz nněj
ěj
Dobře
absorbuje
něný
7
7 1155
Hospodářská
H o s p o d á ř s k á zvířata
zviřata
-e
pro odběr vzorku slin prasat -- bavlněné
Obr.
Soupravaproodběrvzorkuslinprasat
obr. II -_ Souprava
bavlněnélano,
zkumavka,
gelitovésáčkya
zkumavka, iigelitové
rukavice
sóčkya rukavice
provaz
Obr.2
rovazzavesený
obr. 2 - Bavlněný
Bavlněnýp
zavěšenýv kotci
kotci
v v
_ I ~ ; Ť I = >ł € ‹ 2 0
j0 min
Obr.
bavlnéného
pprovazu
rovazuzhrubapo
obr.33 -_ Vyžclirnaíni'
Vyždímóní
bavlněného
zhrubapo 30
min
Obr.4
áčku,
obr. 4 -_ Slitízískaných
slitízískanýchtekutindojednoho
tekutindo jednoho rohuplastikového
rohu plastikovéhossóČku,
opačnýroh
opačnýroh odstřihneme
odstřihneme
pro požadované
požadované
vytlačímedostatečnémnožstvítekutin
vyt|ačíme
dostatečné mnoŽství tekutin pro
je vhodný
provazu, pro odchovny
vyšetření.C
vhodný
vyšetření.
Coo se týčesíly
týče sí|yprovazu,pro
odchovny je
průměr 1,3
pro prasata
prasata ve výkrmu
průměr
výkrmu okolo
1,3 cm a pro
oko|o 1,6
],6 cm.
provaz na 10-25
Doporučuje
Doporučuje se dávatjeden
prasat. Ce|ý
dávat jeden provazna
10_25 prasat.Celý
postup odběru vzorků s|inje poměrnějednoduchý.l*2“4
poměrně jednoduchý.],2'a
postupodběruvzorkůslinje
Optimální
e, když získámealespoň4-5
optimá|ní jje,
získáme a|espoň 4_5 ml
m| ústních
ústních
tekutin,
ož nebýváproblém(viz
tekutin, c
coŽ
nebývá prob|ém (viz obrázky3-5
obrázky 3_5 ).
).
Takto
Takto získanývzorek
získaný vzorek ihned
ihned zchladímea
zch|adíme a co nejdříve
nejdříve
je schopnávzorky
transportujeme
teráje
transportujeme d
doo laboratoře,
laboratoře, k
která
schopná vzorky
ústníchtekutinvyšetřit
obr.6 a 7).
ústníchtekutin vyšetřit ((obr.6
7),
Při odběruslin
v ětšinoubez
odběru s|in V
v rámci
rámci různýchkategorií
rŮzných kategoriívětšinou
bez
prob|ému odebereme
problému
odchovodebereme vzorkyu
vzorky u staršíchzvířatna
zvíiatnaodchovnácha
prasničky.
rasničky.Dospělá
nách a ve výkrmu,popř.odchovávané
výkrmu, popř. odchovávané p
Dospě|á
zvířatajsou
zvířata jsou ne vždy
vždy ochotnadostatečně
ochotna dostatečně žvýkatprovaz,
Žvýkat provaz,
proto je doporučován
a protoje
doporučován tréninka
trénink a ochucování
ochucování žvýkacích
žvýkacích
( n a p ř . roztokem
p r o v a z ů (např.
provazů
r o z t o k e m cukru,
c u k r u , nebo
n e b o džusem).
džusem).
Ochucování
provazu pomáhá i u selat,kterájsou
Ochucování provazupomáhái
se|at,která jsou nemocnemocpři trénování
ná, nebo
ladýchselat.Vzorkujeme
nebo při
trénování m
m|adých
selat. Vzorkujeme spíše
spíše
ráno,kdyjsouprasatavíceaktivní
dběruse
ráno. kdy jsou prasata více aktivní a úspěšnost
úspěšnosto
odběru
se
tím zvyšuje.Na
porodně se doporučuje
píše
zvyšuje. Na porodněse
doporučuje vzorkovat
Vzorkovat sspíše
jsou agresivnější
starší
staršíselata
se|ata kolem
ko|em 20.-25.dne,
20._25. dne, která
která jsou
přitahuje nežmladšíselata.Doporučujeme
aprovazjevíce
a provazjevíce přitahuje
neŽ mIadšíseIata.
Doporučujeme
po odběrupokaždéodstranit
po
odběru pokaŽdé odstranit z kotců všechnyprovazy.
všechny provazy.
provaz
přes noc, proChybouby
rovazVv kotci
Chybou by bylo
nechávat p
bylo nechávat
kotci ii přes
pak tato
prasata se
tože pak
tato hračka ztrácí
ztrácí na atraktivitě
atraktivitě a prasatase
Oo něj přestanouzajímat.Použitýprovaznikdynepoužípřestanou zajímat. Použitý pÍovaz nikdy nepouŽívejteznova
vejte znova k dalšímodběrům.
da|šímodběrům.
Jednotlivékrokyodběruvzorků
Jednot|ivé
krokyodběruVzorků
provaz do kotcese
Uvazemebavlněný
UváŽeme bav|něný provazdo
kotce se zvířaty.
zvířaty.JJee třeba
třeba
dbát
provazu.
d b á t na
n a důkladnéupevněnía
d ů k | a d n éu p e v n ě n í a správnoudélku
s p r á v n o u d é | k u provazu.
Provazuchytíme
Provaz uchytíme tak,aby
tak, aby byl
by| konecasi
konec asi ve výšcerypákuči
výšce rypáku či
lopatkyprasat.Měla
lopatky prasat. Mě|a by na něj
něj snadnodosáhnout,
snadno dosáhnout, zározároveň
provazu
rovazutrusem,
veň ale
musíme zamezitkontaminaci
a|e musíme
zamezit kontaminaci p
trusem,
je provaz
močía
močía krmivem.Nečistývzorekčastoznačí,že
krmivem. Nečistývzorek často značí,žeje
provaz
moc
moc dlouhý.
d|ouhý. JJee vhodnéprovazdát
vhodné provaz dát na místo,kam
místo,kam mohou
mohou
všechnaprasata,pokud
všechna prasata, pokud možnoV
možno v čistšíčásti
čistšíčásti kotce
kotce a ne
přímo u zdrojevodya
přímou
zdroje vody a u krmiva.
krmiva.
Zavěšenýprovaz
ponecháme zvířatům pro žvýkání
Zavěšený provaz ponechámezvířatům
žvýkání
(viz obr. 2).V praxise
po dobu
alespoňpo
praxi se potvrzuje,
potvrzuje,
a|espoň
dobu 30 min
min (vizobr.2).
že
prasat zvyk|ých na provazje
provaz je 20-30min
že u prasatZvyklýchna
20_30 min dostatečný
dostatečný
o/ozvířat
čas
čas na to, aby
aby se na něm
něm vystřídalo70-90
vystřída|o 7o_9o %
zvířat
(25
z kotce(25
kusů/kotec),
kotce
kusů/kotec),cožjejiž
cožjejiž dostatečně
dostatečně reprezentareprezentativnívzorekpro
t i v n í v z o r e k p r o celouskupinu?
ceIou skupinu.3
Provaz
Provaz vyždímámedo
p|astikového sáčku, získanou
vyŽdímáme do plastikového
získanou
j e d n o h o rohu
tekutinu
t e k u t i n u slejeme
s | e j e m e do
d o jednoho
r o h u sáčku,
s á č k u , druhý
d r u h ý roh
roh
odstřihneme
p ř e k | o p e n í m přelejeme
p ř e | e j e m e vvzorekdo
o d s t ř i h n e m e a překlopením
při|oz o r e k d o přilo(nej|épe50ml
ženézkumavky
p|astová zkumavka).
ženézkumavky (nejlépe
50mI plastová
zkumavka).
ı
716
v
Jak
zacházetse
JakzacháZet
vzorkem s|in
se vzorkemslin
Po celoudobu
přepravy vzorkudo
elmi
ce|ou dobu přepravy
vzorku do laboratořeje
|aboratoře je vve|mi
důležitézachovatchladícířetězec.Vzorky,které
dů|ežitézachovat ch|adícířetězec. Vzorkv' které budou
budou
gtzou
VETERINAŘSTVÍ
9/2014
VETERINÁŘsTVí
J^.^^A4ř.|,
i -',;ř-rH
z4 vávi l í oř Lao t a
v up
u oo
r dá
I r uo) s
) Nřos k
O
b r .55 -_ Sslitívzorku
l i t rv' z o r k suslin
l i nddo
ozzkumavky
kumavky
obr.
Vzorek
zkumavce
O
b r .6 -_ V
z o r esslin,
kl i n rresp.
, e s p ú.ústních
s t n í c ttekutin,
he k u t i nv ,pplastové
l a s t o v550ml
é0 m Z
l kumavce
obr.
nutné
odeo
d e s l á nVvyd
e no
d b ě r ujjee
, n
u t n ézzach|adit
a c h l a daai trrychle
y c h l eo
deodes|ány
den
odběru,
+ 33.c),
ss|at
l a td
a b o r a t o ((4
ř 4e±
° C ) ,n
nej|épe
e j l é p Vve cch|adicím
h l a d i c íb
boxu
mo x učči
i
doo llaboratoře
nna
a l|edu.
e d u .P
Pokud
o k u dn
ne|ze
e l z eV
vzorky
zorkd
ydoručit
oručd
do
i to l|aboratoře
a b o r a t o Vvř ed
den
en
po
vzorky
okamžitě
odběru
zamrao
d b ě r ujjee
, n
u t n év
z o r k ss|in
y l i no
k a m ž i tp
ěo o
dběru
Z
amraodběru,
nutné
nutná,
neboť
obsahují
mnohé
zzit.
itT
.Tato
a t oo
p a t ř e jsou
n í j sn
ouut n án
, e b o ss|iny
ť l i n yo
b s a h um
j ín o h é
opatření
např.
RNA
b
a k t e r iaae e
n z y m yaa n
a p ř .vvirus
i r u sPPRRS
R R Saa jjeho
e h oR
N Avvee ssIilibakterie
enzymy
proces
ve|mi
Ch|adící
degran
á c hv
e l m rrych|e
i y c h l ed
e g r a d uC
jíh
. l a d í cp
ír o c e tstuto
u t od
egranách
degradují.
dochád
a c izzpomaluje.
p o m a l u jKKe d
. a l š í m zzpracování
up r a c o v ávvzorků
nzí o r k ůssIin
l i nd
ochádaci
da|šímu
potřeba
s|in
není
dá|e
zzíí Vv l|aboratoři.
a b o r a t oČ
ř ii .r évvzorky
z o r k sy
l i nn
e n íp
o t ř e bd
a á l ezzpracopracoČiré
centrifugujeme
deset
vvávat,
á v a t v,výrazně
ýrazně
zznečištěné
n e č i š t ě nvvzorky
éz o r k yc
e n t r i f u g u j ed
mees e t
pak
přepipetujeme
4 °"C)
dooe ččisté
m
i n u t((10o0
1 0 0 0gg ppÍi
ři4
C ) aa p
akp
řepipetujem
d
isté
minut
pak
EL|SA
zzkumavky.Testován
k u m a v kTy e. s t o v ájje
ne p
a kVv E
L I S Attestu
e s t ussupernatant.
upernatant.
k
o n o paí n
' y l o n uP
. o l o v i nvvzorků
az o r k ůb
y l azzpracovaná
p r a c o v a n((centcáe n t konopí
ny|onu.
Polovina
byla
polovina
Zároveň
rrifugace
i f u g a c ae ffi|trace)
i l t r a c ea) p
olovina
n
e z p r a c o v a nZ
áá. r o v e ň
nezpracovaná.
pěti
prasat
o
d e b r assérum
l ié r u mo
odd p
ě t ip
r a s azzkaždého
t k a ž d é h kkotce.
oo t c eS
S|edova|i
. ledovali
odebra|i
proti|átky
proti
p
rotilátk
p
yr o t vviru
i i r uPPRRS
R R Saa cce|kové
e l k o vm
mnoŽství
é n o ž s t viimunog|om
í unoglob
u l i n ů((|9A'
I g A ,||9M
g Maa ||9G).
g G ) .N
Nezpracované
e z p r a c o v avvzorky
nzéo r k yb
by|y
y l yttestoestobuIinů
pomocí
vvány
á n ynnaa P
R R Sp
o m o cqqRT-PCR
í R T - P C Ra zzpracované
p r a c o v a nvvzorky
éz o r k ynnaa
PRRS
proti|átky.
použiPPRRS
R R Sn
eutralizap
č
n
r oí t i l á t kV
yý.s l e d kuukáza|y,
yk á z a l yžže
,e p
oužineutraIizační
Výs|edky
proti|átky
ttýý m
a t e r i án
l e m ě lV
l i v nnaa l|9G
g G PPRRS
RRS p
r o t i l á t kV yttestu
estu
materiá|
nemě|
v|iv
E
L I S A ,aa|e
le m
a t e r i ázzásadně
lá s a d n ěo
v l i v n vvýs|edky
i lý s l e d kqqRT-PCR'
yR T - P C R ,
EL|SA,
materiá|
ov|ivni|
pí c
rroh
|g
9A
h Il aaddi ni n
P RRRRsSVVn
p
ot it|iál táetkea kh llaaddi ni yn Iy
A
uu
n eeuut rt ar Iai zl iazčančí n
ch
Z ppr raa
c ocvoá v
n íá nv zízoor kr ů
n ěn ě
o vv| li vi v
n in| oi l o
a l| g9 M
M.. Z
k ůtt aakkéé v ýýzznna m
am
o
pravděpodobně
kvantifikace,
V
ý s l e d k yk
v a n t i f i k a cae ,ttoo p
r a v d ě p o d o b ssníŽením
nněí ž e n í m
výs|edky
pozitivních
počtu
kkoncentrace
o n c e n t r a cV
ei r o v éR
NA.N
e j v y š š í hp
oo č t up
ozitivních
virové
RNA.
Nejvyššího
pomocí
vvzorků
z o r k ůqqRT-PCR
R T - P C Rb
y l od
o s a ž e np
oo m o cbbav|ny.a
íavlny.4
bylo
dosaženo
Strategie
zorkování
StrategievVzorkování
poskytporovnávaIi
S
e d d o nM
o l . 3p
orovnáva
o
lci h o t u
žžvýkat
v ý k ap
toskytM.. Y
Y.. a kko|.3
ochotu
Seddon
provazy
prasat
n
utép
r o v a z yu 1155
55 p
r a s a tu
s t á j e n ý cnna
ha rroštech
o š t e c h((44
nuté
ustájených
podestý|ce,
popu|aDospě|i
o t c e )aa nnaa p
odestýlce
ss|ámě
l,á m ě((čtyři
č t y ř ikkotce).
o t c e ) .D
ospěli
vzorek
danou
S
l i n jsou
y j s oS
um ě s n V
ý z o r e rkreprezentující
e p r e z e n t ud
j íacní o up
o p u l a - kkotce)
Sliny
směsný
jsou
pro
prasata
provazy
atraktivní
k zzávěru,
á v ě r užže
,e p
r o v a z y j s vvíce
oíuc ea
t r a k t i vp
nríop
r a s a t cchoah o úrovni
ccii ((kotec).
k o t e c )P
. r o v á d í mttak
ea k d
i a g n o s t i knna
ua ú
r o v n sstáda
i táda
Provádíme
diagnostiku
pro
působí
poskytují
nový
stimuI
exp|oa n ánnaa rroštech,
o š t e c hkkde
,d ep
ů s o bjako
í j a kn
oo v ýS
t i m up
l r oe
xplomoŽnost
aa ssIiny
l i n yjjako
a k ovvzorek
z o r e kn
á m ttak
akp
o s k y t um
j í o ž n o sccenově
t e n o v ě vvaná
nám
programu
nedoš|o
rrační
a č n ícchování.
h o v á n íK
. e zzvýšení
v ý š e na
í t r a k t i v inna
t ay ss|ámě
l á m ěn
edošlo
Ke
atraktivity
v
ý h o d n é hp
or o g r a m ssurvei||ance.
uu r v e i l l a n cS
et .o j ízzaa ú
v a h u zzda
, da
výhodného
9tojí
úvahu,
p|ně
poo u
provazů
prostředí.
a
ni p
m í s t ě nvvíce
íí c e p
r o v a z ůd
r o s t ř e dJJako
í a. k o p
lně
ani
umístění
doo p
n
e n a h r a drrutinní
iut t i n nssurvei||ace,
íu r v e i l l a ckkdy
ed,ysse
e ttestuje
e s t u j 11
e xx 330
0 vvzorzornenahradit
průběhu
perimin,
d
o s t a t e č nsseeájjeví
e v íd
o b a4455 m
i n ,kkdy
d yVv p
r ů b ě httéto
ué t op
eriPočet
dostatečná
doba
kků
ů ssér
é r zzaa m
ě s í c ,n
ě k o l i k vvzorky
az o r k ysslin
l i nzzaa ttýden.ro
ý d e n .P
“o č e t
měsíc,
několika
o/ozzvířat
provaz
provazů)
daného
o
d y žŽvýka|o
v ý k a l op
r o v a zm
i n i m á l n880
ě0 0/0
v í ř a zt d
aného
ody
minimá|ně
vvzorků
z o r k ů((počet
p o č ep
t r o v a z ůaa)ffrekvence
r e k v e n cvvzorkování
ez o r k o v ázzá|eží
náí l e žnna
ía
přičemŽ
počtu
počtu
preva|enci
o t c e ,p
ř i č e m žn
e j v y š šn
íá r ů s p
t o č t uzzvířat
v í ř a žŽvýkajících
t výkajících
nejvyšší
nárůst
p
o č t uzzvířat
v í ř a((na
tn affarmě,
a r m ěVv, kkotci),
o t c i )p
, r e v a l e no
cni e m o c n ě n í , kkotce,
onemocnění,
prvních
provaz
průběhu
rovab
zby|
y lVv p
r ů b ě hp
u r v n í c 115
h5 m
i n .R
eprezentativnost
min.
Reprezentativnost
sspecifitě
p e c i f i taaěssenzitivitě
e n z i t i v id
diagnostického
tě
i a g n o s t i c k ěttestu
ehsot uaa nna
ad
důvodu
ůvodu p
aknnaeem
provazu
případě
vvzorku
z o r k ul|ze
z evvylepšit
y l e p šu
i tm í s t ě n í d
ma l š í h p
o r o v a z Vvu p
řípadě
umístěním
da|šího
tt e
(( d
dí iiaaggnnoos tsi tkio
o
mooc cn n
ě něínm
m
, í oo
, nni ti toor irni gn)g. ) .
e ssttoovvá á
n ín
průběhu
p rr oovvááddě |ěi d
o š t o v é hu
ustájení.
os t á j e n V
í. p
r ů b ě h uttéto
é t os
studie
t u d i eo
odpovída|
dpovídal
P
d
l iiiaaggnnoos tsi kt iuko
ounneemmooc n
c ěnněín í rroštového
P ookkuudd b
b yycchhoommp
provazu
pouŽít
pět
provazů
z o r e zkzískaný
í s k a nzýjjednoho
e d n o hp
or o v a z sskupině
uk u p i n ě
1
17_24zvířat.3
7 - 2 4z v í ř a t . 3
vzorek
((PRRS'
PRRSP
,PcV2'
C V 2 ,S
I V ) ,m
ě l ob
ep
o u ž íddva
t v aaaž
žp
ě tp
rovazů V
S|V).
mě|o
byy sse
((vzorků)
v z o r k ůnna
) a jjednu
e d n uffarmu/ha|u.
a r m u / h a lC
Co
u o. sse
e ttýče
ýčen
načasování
ačasování
pravděo
d b ě r uuu, n
nemocných
e m o c n ý czzvířats
hv í ř ast a
akutní
k u t niinfekcí,
ín f e k c kkde
í ,d ep
ravděodběru,
podobně
probíhá
p
odobně
p
r o b í h ávviremie,
i r e m i eb
budeme
, u d e m ettesty
e s t yssměřovat
m ě ř o v anna
ta
pět
přímý
průkaz
PRRSV
dva
p
ř í m ýp
r ů k a vviru
z i r um
metodou
e t o d oP
PCR
u C R ((např.
n a p řP
. R R S Vd
v aaaŽ
žp
ět
příznaků,
ttýdnů
ý d n ůvviremie).
i r e m i e )P
Po
.o o
odezněnÍ
d e z n ě nkk|inických
í l i n i c k ý cp
hř í z n a k ůkkdy
,d y
pt rů
n
s t puje
u p u ssé
j eérokonve
r o k o n vrze,
e r zl|ze
zeeV
,vyyuŽít
u ž íp
r ůkazu
k a z su
specifi
p e c ickýc
f i c khý c h
naastu
proti|átek
úče|em
určení
p
r o t i l á t ttestem
eeks t e mE
EL|SA.
L I S AN
Na
. am
monitoring
o n i t o r i nzzaagú
č e l e mu
rčení
PRRSV'
n
á k a z o v é hsstatusu
ot a t u s usstáda
t á d a((např.
n a p ř .sstatus
t a t u ssse|at
e l a t-- P
RRSV,
nákazového
S
I V )d
o p o r u č u j e ttři
mř ip
eprovazy
r o v a z((vzorky)
yv z o r k ynna
)a ffarmu/haIu
a r m u / h avve
l eu
5|V)
doporučujeme
vvěku
ě k u110
0 ttýdp;1..o,to
ýdnů.l°““
praktickéaaspekty
Některé
spekty
Některépraktické
pozitivní
O
l s e nC
o l . 4ttestovali
e s t o v ad
dvě
l iv ě P
PRRSV
R R S Vp
o z i t i v nffarmy
aí r m y
C.. a kkol.a
Olsen
pouŽití
a cce|kem
e l k e m1
04k
o t c ůzzvířat.
v í ř a tZ
ZjišťovaIi
. j i š ť o v avv|iv
lli i vp
o u ž i tb
bav|ny,
ía v l n y ,
104
kotců
V
ETERINAŘST
9
stzolc
V
/ 2Í 0 1 4
vtttntNÁŘsrví
'*-,,4
I
-_
_ , . . ı ı ı .
O
b r .7 -_Vzorek
V z o r eppřipravený
k ř i p r a v e kkn zachIazení
zý a c h l a z ea nkk ittransportu
ar a n s p o rddo
t uo
obr.7
llaboratoře
aboratoře
›
7
7 1177
-(ř.
!^.^^....l
ttu)puuot)\o
Hospodářskázvířata
|, -
-',íř-t4vtoLo
PrickettJ.
Prickett J. R.
R. a kol.2jakoprvnívalidovali
ko|.,jako první vaIidovaIi technikuodbětechniku odběru vzorků slin _aa diagnostiku
diagnostikuPRRS
PCV2 Vv komerčních
PRRS aaPCV2
komerčních
prasat. Na třech
chovech
chovech prasat.
třech farmách
farmách byly
by|y opakovaněodeopakovaně odeprasat z šesti kotců každéfarmy(20-30
bírányVzorkyslin
bírány vzorky sIin prasatZ
kaŽdé farmy (20_30
potom
prasat/kotec).Od
prasat/kotec).
běry bylyve
by|y ve třetímtýdnu
třetím týdnu stáří,
stáří,a potom
odběry
je
přičemŽ
12. a 16.
16. týden,
uvádějí, Že Virus
virus PRRS je
5.,
5.' 8.,
8.' 12.
týden, přičemž uvádějí,že
po
detekovatelnýpo
dobu
detekovate|ný
dobu tří až
až osmi
osmi týdnů a PCV2
PCV2 déle
dé|e
je podle
pod|e této
než
než osm
osm týdnů. Metoda
Metoda vzorkováníslin
vzorkování s|in je
pro zdravotnímonitoringPRRS
studieVhodná
studie vhodná pro
zdravotní monitoring PRRS a PCV2
PCV2 ve
stádě
stádě s odběremve
odběrem ve dvou-až
dvou- aŽ čtyřtýdenních
čtyřtýdenních intervalech?
intervaIech.2
Závěr
Závěr
Nabízíse
Nabízíse otázka,zda
mohou vzorkyslin
vzorky s|in nahraditvzornahradit vzor.
otázka, zda mohou
ky séra
séra např.
např. V
v surveillancePRRSV.
survei||ance PRRSV. Je
.Je zřejmé, že
že vzorky
vzorky
jsou výbornou
pomůckou pro
pro veterinární
slin
výbornou novou
novou pomůckou
Veterinární
sIin jsou
pravdou, že
lékaře
|ékaře ii epidemiology.Je
Že vzorky
vzorky slin
epidemio|ogy. Je také pravdou,
s|in
jsou
popu|aci, ale
a|e nemohou
nemohou
jsou sice reprezentativnípro
reprezentativní pro populaci,
vzorky
některých spenikdyzcela
zorkyVv některýchspenikdy zce|a nahraditindividuální
nahradit individuá|ní V
např. u kvantitativního
kvantitativního v
vyhodnocifickýchsituacích,jako
yhodnocifických situacích,jako např.
při snaze
covánívýsledků(např.qPCR
či při
snaze o izolaizo|acování výs|edků (např. qPCR u PCV2), či
prob|ematické).
ci/sekvenaci
mikroorganismů (ze slin
s|in problematické).
cilsekvenaci mikroorganismů(ze
Jistou
nevýhodou zůstává nutnostzachováníchladícího
nutnost zachování ch|adícího
Jistou nevýhodouzůstává
řetězcea
řetězce a způsobodeslánívzorků
způsob odes|ání vzorků slin,
coŽ zásadněovlivzásadně ov|iv.
s|in,což
ňuje
vzorkováňuje kvalituVýsledků.Je
kvaIitu výs|edků.Je správnépoukázat,že
správné poukázat, ževzorkováj e nevhodnéči
p ř í m o nepoužitelnéV
ní
n e p o u ž i t e | n év některých
některých
n í slin
s | i n je
n e v h o d n é č i přímo
prasnice. Podstatné
případech pro
pro sající
pro prasnice.
případech
Podstatné
sajícíselata
se|ata a pro
je,
jsou
pro vyšetření
rovněž
rovněž je, že
že pro
vyšetření slin
s|in jsou nutné specifické
specifické
jako vzorku
pravděpodob.
laboratorní
|aboratorní ttesty.
esty.Využitíslin
Využitís|in jako
vzorku pravděpodobně není vhodnépro
vhodné pro některérutinnětestovanépatogeny
některé rutinně testované patogeny
jako
jako např.
např. APP
APP či
hyopneumoniae. V
Výhodou
ýhodoutestování
testování
či M. hyopneumoniae.
slin
v ý h o d n é h o monitoringu
monitoringu
s | i n zůstává
z ů s t á v á možnost
m o Ž n o s t cenově
c e n o v ě výhodného
popu|ace (PRRSV PCV2,
popř. programusurveillanprogramu survei||anpopulace(PRRSV,
PcV2' SIV),
5|V)' popř.
jedná o jednoduchýneinvazivní
jednoduchý neinvazivní
ce. Důležitéje,
Dů|eŽitéje, že
Že se jedná
odběrvzorku
vzorkováodběr vzorku bez
bez stresuzvířat.Zjednodušené
stresu zvířat.Zjednodušené Vzorkování
ní by tak
moh|o umožnit
rozsáh|ý monitoring,častější
monitoring, častější
tak mohlo
umoŽnit rozsáhlý
poskytnout
testování,Vyšší
testování, vyššísenzitivituna
senzitivitu na úrovnifarmya
úrovni farmy a poskytnout
přesnější mapování epidemio|ogické situace.Pokud
tak
tak přesnějšímapováníepidemiologické
situace. Pokud
potaz ii ekonomickoustránkus
vezmemeV
Vezmeme V potaz
ekonomickou stránku s celkověnižšíce|kově niŽšími nákladyna
nák|ady na odběra
odběr a testování,může
testování, můŽe mít
mít využitívzorků
vyuŽitívzorků
prasat v budoucnuzásadnívýznam.
slin
s|in prasatV
budoucnu zásadní význam.
Literatura:
Literatura:
1.
1.
Kittawornrat,
., Prickett,J.,
Panyasing, Y,
Kittawornrat, A
A.,
Prickett,..l.,Wang, C.,
C., Olsen, C.,
C., Irwin,
lrwin, C.,
C., Panyasing,Y.,
Ballagi,A.,
., Hoogland,M.,
Ballagi, A., Rice, A.,
A., Main,
Main, R.,
R.,Johnson,J.,
Johnson, J., Rademacher,
Rademacher, C
C.,
Hoogland, M.,
Rowland,R.,
Rowland, R.,Zimmerman,
Zimmerman, JJ.. Detectionof
Detection of Porcinereproductive
Porcine reproductive and respi(PRRSV) antibodiesin
ratorysyndromevirus
ratory syndrome virus (PRRSV)
antibodies in oral fluid
fluid specimensusing
specimens using
a commercial
c o m m e r c i a l PRRSV
P R R S V serum
s e r u m antibody
a n t i b o d y enzyme-linkedimmunosorbent
enzyme-linked immunosorbent
assay.J
Invest.2012;24(2):262-269.
assay.J Vet Diagn
Diagn Invest.2012;24(2):262-269.
2.
Prickett,
Simer,R.,
2.
Prickett,JJ.. R.,
R.,Kim,W.,
Kim, W.,5imer,
R.,Yoon, K.
K. J.,
J.,Zimmerman,
Zimmerman, JJ.. Oral-fluidsamOral- fluid samples for surveillance
growing
pigs for porcinereproductive
porcine reproductive
plesfor
rowingpigs
commercjal g
surveillance of commercial
and respiratory
respiratory syndromevirus
syndrome virus and circovirustype
circovirus type 2 infections.
infections.J Swine
Swine
HealthProd
Health Prod 2008;16:86-91.
2008;16:86-91
3.
Seddon,M.
3.
Seddon, M. Y.,
Y, Guy, H.
H. J.,
J., Edwards,A.
Edwards, A. S.
S. Optirnising
Optimising oral fluid
fluid collection
collection
from
groups of pigs: Effectof
provision of ropes.Vet
from groupsof
Effect of housingsystemand
housinq system and provisionof
ropes. Vet
Journal2012;193:180-184.
Journal 201 2; l 93:l 80-184.
718
5.
Olsen, C.,
C., Karrlker,
Karriker, L.,
1., Wang,
Wang, C.,
C., Binjawadagi,B.,
Binjawadagi, B., Renukaradhya,G.,
Renukaradhya, G.,
Olsen,
Kittawornrat,
., Panyasing,
Kittawornrat,A.,
A., Lìzano,S.,
Lizano, 5.,Coetzee,J.,
Coetzee, J., Main,
Main, R.,
R.,Meiszberg,
Meiszberg, A
A.,
Panyasing,
Y.,
Y.,Zimmerman,
Zimmerman, JJ.. Effectof
Effect of collectionmaterialand
collection material and sampleprocessingon
sample processing on
pig oral fluidtestingresults.
etJ.l 2013;198(1):158-63.
fluid testing results.V
Vet
201 3;l 98(1):l 58-63.
Detmer,S.
Detmer, S. E.,
E.,Patnayak,
Patnayak,D
D.. P.,
P, Jiang,Y.,
Jiang, Y, Gramer,M.
Gramel M. R.,
R.,Goyal,S.
Detection
Goyal, S. M. Detection
porcine oral fluid
of lnfluenzaA
Influenza A virus in porcine
fluid samples.J
samples. J Vet Diagn
Diagn Invest
lnvest
-7.
2011;23(2):241-7.
201 1;23(2):241
Giménez-Lirola,
T., Zavala,
Giménez-Liro|a,L.
L. G.,
G., Xiao, C.
C.I',
Zava|a, M., Halbur,
Ha|bur, P.
P. G.,
G., Opriessnig,
opriessnig, TT..
lmproving
Improvin9 ante
EÍysipe|othÍiX
rhusiopathiae
rhusiopathiae iinfection
nfection
ante mortemdiagnosis
mortem diagnosis of
of Erysipelothrix
by use of oral fluidsfor
ucleicacid,
fluids for bacterial,
bacterial, n
nucleic
acid, and antibodydetection.
antibody detection. J
Microbiol
M i c r o b i o lM
M eethods2013;92(2):113-21.
thods 2013;92(2):113-21.
Meiszberg,
nd oxytetracycline
n oral fluids
Meiszberg, e
ett al.,
al.,Detectionof
Detection of cefthiofur
cefthiofur a
and
oxytetracycline iin
fluids
pen-side competitive ELISAtest
of swinewith
ELISA test after intramuscular
intramuscular injectiinjectiswine with pen-sidecompetitive
on. J.lVet Pharmacol
herap2011;34:5I5-517.
Pharmacol T
Therap
20 11;34:515-5 17.
L., Pallarés,F.
F.J.,
Gutiérrez,AA.. M., Martinez-Subiela,
S., Soler,L.,
Martínez.Subie|a,5.,5o|er,
Pa||arés,
J.,Cerón,J.
Cerón, J. J.
J. Use
protein quantifications in porcine
porcine
of salivafor
saliva for haptoglobin
haptoglobin and C-reactive
C-reactive proteinquantifications
field conditions.
respiratory
respiratory and reproductive
reproductive syndromeaffectedpigs
syndrome affected pigs in field
conditions.
Vet lmmunollmmunopathol
lmmunol lmmunopathol 2009;
2OO9;132, 218-223.
pomocný ukazate| úspěšnostip
při.
Pink, R.
slině jako pomocnýukazatelúspěšnosti
řiR. Hladinaneutrofilů
H|adina neutrofi|ůve slinějako
periferních
hojení neutrofilůpo
eriferníchkrvetvorných
neutrofi|ů po autolognítransplantaci
auto|ogní transp|antaci p
krvetvorných
-70.
buněk.LF'Univerzita
alackéhoVV Olomouci.
008:1-70.
Pa|ackého
o|omouci. 2
2008;1
bunék. Ll- Univerzita P
Kittawornrat,
., Prickett,
., Schwartz,
., Whitney,D.,
Kittawornrat,A.,
A., Engle,M.,
Engle, M.,Johnson,
Johnson, JJ.,
Prickett,J.1.,
Schwartz,TT.,
Whitney, D.,
Olsen,C.,
., Schwartz,K.,
Wang, C.,Zimmerman,
Zimmerman, JJ.. PorcinereproPorcine reproOlsen, C.,Chittick,
Chittick,W
W.,
Schwartz, K.,Wang,C.,
( P R R S V )in
ductiveand
d u c t i v e a n d respiratory
r e s p i r a t o r ysyndromevirus
s y n d r o m e v i r u s (PRRSV)
i n serum
s e r u m and
a n d oral
o r a l fluid
fluid
fluid replace
samplesfrom
samples from individualboars:
individual boars: will oral fluid
replace serum
serum for PRRSV
surveillance?
s u r v e i l l a n c eV
? iirus
r u s Res
R e s 2010;154:170-176.
2 0 10 ; l 5 4 : 17 0 - 17 6 .
Prickett,J.,
K . J.,
E v a n s , R.
R . 8B.,
.,
P r i c k e t t ,J . , sSimer,
i m e r , R.,
R . , Christopher-I-iennings,
C h r i s t o p h e r H e n n i n g s ,J.,
J . , Yoon,
Y o o n , K.
J . , Evans,
porcine reproductive and respiratory
Zimmerman,
Zimmerman, Ji.. J.
J. Detectionof
Detection of porcinereproductive
respiratory synporcine oral fluid
dromevirus
fluid samples:A
longitudinal study
study
drome virus infectionin
infection in porcineoral
samples: A longitudinal
underexperimental
under experimental conditions.
conditions. J Vet Diagn
Diagn Invest2008;20:156-163.
Invest 2008;20:l 56- l 63.
1 2 . Smith,D.
R.,Moxley,R.
Moxley, R. A.,
A., Clowser,S.
Clowsel S. L.,
1.,Folmer,J.
Folmer, J. D.,
D.,Hinkley,S.,
Hinkley, S., Erickson,
smith, D. R.,
G. E.,
E., Klopfenstein,
Klopfenstein,T.
T. J.
J. Use of rope devicesto
devices to describeand
describe and explainthe
explain the
feedlotecologyof
feedlot ecology of Salmonellaby
time and place. FoodbornePathol
Foodborne Pathol Dis
Salmonella by time
2005;2:61-69.
2005;2:6^l-69.
' 1 3 . Mur, L., Gallardo,C., Soler, A., Zimmermman,J.,
V, Nieto, R.,
R.,
1., Gallardo, C., soler, A., Zimmermman, J., Pelayo, V.,
j. M., Arlas
Sánchez-Vizcaíno,
Sánchez-Vizcaíno,J.
Arias M. Potentialuse
PotentiaI use of oral
oraI fluid
f|uid samplesfor
samp|es for
serological
iagnosisof
African swine
Microbiol 2013;165(lserological d
diagnosis
of African
swine fever. Vet Microbiol2013;165(12):135-139.
2 ) : 13 5 - l 3 9 .
Ramirez,A.,
., Yoon, K.
Ramirez, A., Wang, C.,
Prickett.JJ.. R.,
R., Pogranichniy,
Pogranichniy, R
R.,
K. J.,
1.,Main,
Main, R.,
R.,
C., Prickett,
Johnson,
., Hooglancl,
., Hoffmann,
Johnson, JJ.. K.,
K.,Rademacher,
Rademacher,C
C.,
Hoogland, M
M.,
Hoffmann, PP,., Kurtz,A.,
Kurtz, A., Kurtz,
populations using oral
E.,
E., Zimmerman,J.
Zimmerman, J. Efficientsurveillanceof
Efficient surveillance of pig populationsusing
fluids.PrevVet
fluids. Prev Vet Med
Med 2012;104(3-4):292-300.
201 2;l 04(3-4):292-300.
|5,
Prickett,J.
Murtaugh, M. P.,
., Wang, C.,
Prickett, J. R.,
R., Johnson,J.,
Johnson, J., Murtaugh,M.
P, Puvanendiran,
Puvanendiran, SS.,
C.,
Zimmerman,
Zimmerman, JJ.. J.,
Prolonged Detection of PCV2 and AntiAntiJ., Opriessnig,
Opriessnig, TT.. ProlongedDetectionof
PCV2
P c V 2 Antibody
A n t i b o d y in
i n Oral
o r a I Fluids
F I u i d s Following
F o I l o w i n g Experimentallnoculation.
E x p e Í i m e n t a || n o c u l a t i o n .
Transbound Emerg Dis 2011;58:121-127.
201 1;58:121-'127.
TransboundEmerg
1 6 . Costa,G.,
Costa, G., Oliveira,S.,
Oliveira, S.,Torrison,J.,
Torrison,J., Dee, S.
5. Evaluation
Evaluation of Actinobacillus
Actinobacilluspleuropneumoniae
iagnostictestsusingsamplesderivedfrom
ropneumoniae ddiagnostic
tests using samples derived from experimentaexperimentally infectedpigs.Vet
2011;148(2-4):246-51.
011;148(2-4):246-51.
infected pigs. Vet Microbiol
Microbiol 2
t 7 Chittick,
C h i t t i c k ,W
w . A.,
A . , Stensland,
S t e n s l a n d ,W .. R.,
R . , Prickett,J.
P r i c k e t t .J . R.,
R . , Strait,E.
S t r a i t , E . L.,
1 . , Harmon,K.,
Harmon, K.,
Yoon,
Y o o n , K.
K . J.,
J . ,Wang,
W a n g , C.,
C . , Zimmerman,
Z i m m e r m a n , J .. J.
J . Comparisonof
C o m p a r i s o n o f RNA
R N A extraction
extraction
and
a n d real-time
r e a l - t i m e reverse
r e v e r s e transcriptionpolymerase
c h a i n reaction
reaction
t r a n s c r i p t i o n p o l y m e r a s e chain
methods
m e t h o d s for
f o r the
t h e detectionof
d e t e c t i o n o f Porcine
P o r c i n e reproductive
r e p r o d u c t i v e and
a n d respiratory
respiratory
p o r c i n e oral
syndromevirus
s y n d r o m e v i r u s in
i n porcine
o r a l fluid
f l u i d specimens.J
s p e c i m e n s . J Vet
V e t Diagn
D i a g n Invest
Invest
2011;23(.2):248'53.
2011;23(2):248-53.
'18.
Kittawornrat,
Wang, C.,
Kittawornrat,A.,
A.,Wang,
C., Anderson,G.,
Anderson, G., Ballagi,A.,
Ballagi, A., Broes,A.,
Broes, A., Carman,S.,
Carman, S.,
Doolittle,K.,
S., Nelson,
Doolittle, K., Galeota,J.,
Lizano,5.,
Nelson, E.,
E., Patnayak,D.,
Patnayak, D.,
Galeota, J., Johnson,J.,
Johnson, )., Lizano,
Pogranichniy,
Pogranichniy,R.,
R.,Rice,
Rice,A.,
A., Scherba,G.,
Scherba, G., Zimmerman,
Zimmerman, JJ.. Ring test evaluation
evaluation
of the
the repeatability
repeatability and reproducibility
reproducibility o
off a Porcine
Porcine reproductive
reproductive and
respiratory
respiratory syndromevirus
syndrome virus oral fluid
fluid antibodyenzyme-linked
antibody enzyme-linked Immunoimmunosorbentassay.J
sorbent assay.J Vet Diagn
Diagn Invest2012;24(6):1057-63.
Invest 201 2;24(6):1057-63.
Adresaautora:
Adresa autora:
MVDr.TomášJirásek
MVDr. TomášJirásek
MEVET
MEVET spol.S
spol. s r.
r. o.
o.
Pod
Pod Svahem
Svahem 1791/6a
179116a
Praha
Praha 44
VETERINÁŘSTVI'
9gtzotl
/2014
VETERINÁŘsTVÍ
Doc.l\
Doc.l
Marti
Marti
Svobı
Svobr
choro
choro
F\/L
FVL