Použití Úvod Princip testu

CerTest-VIDITEST
Strep A Card
Jednokrokový kazetový test pro detekci antigenu Steptokoka A ve výtěru z krku
Návod k použití soupravy
Výrobce: CerTest, E-500 18 Zaragoza, Spain
Distributor: VIDIA spol.s r.o., Nad Safinou II č. 365, Vestec, 252 42 Jesenice, ČR, tel: +420 261 090 565
Použití
CerTest-VIDITEST Strep A Card je jednokrokový chromatografický test pro kvalitativní
detekci antigenu Steptokoka A. Může být použit pro krční výtěry, nebo pro potvrzení
pravděpodobného nálezu kolonií Streptokoka A v kultuře.
Úvod
Streptokokové infekce typu A jsou způsobeny Streptokokem A, bakterií zodpovědnou za
širokou škálu zdravotních problémů. Tyto infekce se mohou projevovat od lehkého kožního
zánětu nebo bolesti v krku až po závažné život ohrožující stavy, jako je syndrom toxického
šoku a nekrotizující fascitis (postižení měkké tkáně). Většina lidí zná streptokokovou krční
infekci, která je vedle méně závažné kožní infekce nejčastější formou nákazy. Zdravotní
experti odhadují, že se každý rok objeví více než 10 milionů mírných infekcí krku a kůže
tohoto typu. Běžný způsob identifikace Streptokoka typu A z krčních výtěrů zahrnuje izolaci
a následnou identifikaci živých patogenů technikou trvající 24 až 48 hodin, někdy i více.
CerTest-VIDITEST Strep A Card detekuje živé i neživé organismy přímo z krčního výtěru.
Výsledky poskytuje do 5 minut.
Princip testu
CerTest-VIDITEST Strep A Card je kvalitativní imunochromatografický test pro stanovení
antigenů Streptokoka typu A. Na testovací zóně membrány kazety jsou navázány myší
monoklonální protilátky.
Během testování vzorek reaguje s imobilizovaným barevným konjugátem (anti Strep A protilátky – červená mikrosféra). Směs pak kapilárním efektem vzlíná vzhůru po
membráně. V případě pozitivního výsledku je barevný konjugát zachycen specifickými
protilátkami, což se ve „výsledkové zóně“ projeví jako červená linka. Směs pak vzlíná dále po
membráně k imobilizovaným protilátkám v „kontrolní zóně“, kde se vždy na konci testu
objeví modrá linka. Přítomnost modré linky ověřuje:
1) že se použil dostatečný objem vzorku,
2) že došlo ke správné vzlínavosti vzorku,
3) interní kontrolu reagencií.
-1-
Obsah soupravy
-
Kazetové testy (obsahují jednorázové plastové pipety)
Reagencie A (2M dusitan sodný) a Reagencie B (0,15M kyselina octová)
Testovací zkumavky
Sterilní odběrové tampony
Manuál
Potřebný materiál nedodávaný se soupravou
-
Jednorázové rukavice
Stopky
Sběr a příprava vzorků
Vzorky odebírejte sterilním odběrovým tamponem z mandlí a zadní části hrtanu. Buďte
opatrní, aby stěrka nepřišla do styku se zuby, dásněmi, jazykem a vnitřní stěnou tváří.
Zpracujte co nejdříve po odebrání vzorku. Pokud vaše laboratoř vyžaduje kromě CerTestVIDITEST Strep A Card i výsledky bakteriální kultury, potřete odběrovým tamponem se
vzorkem kultivační misku ještě před začátkem testu. Působením extrakčních reagencií testu
vzorek odumírá.
Vzorky mohou být před testováním skladovány při laboratorní teplotě, nebo v chladničce (24°C) maximálně po dobu 24 hodin. Vzorky a testovací sada musí být před použitím
temperovány na laboratorní teplotu.
Potvrzení kultury
CerTest-VIDITEST Strep A Card může být použit také k potvrzení identifikace Streptokoku
typu A na miskách s krevním agarem. Misky nesmí být starší než 72 hodin. Lehce se dotkněte
1-3 předpokládaných kolonií Streptokoku A (ty které vykazují charakteristickou beta
hemolýzu) sterilním vatovým tamponem. Vzorek pak dále testujte podle návodu.
Pracovní postup
Před testováním nechte součásti soupravy i vzorky vytemperovat na laboratorní teplotu (15 –
30°C). Neotvírejte obal, dokud nebudete připraveni test provést. Temperujte pouze tolik
testovacích souprav, kolik právě potřebujete.
-
Do testovací zkumavky přidejte pět kapek reagencie A (růžová) a 5 kapek reagencie B
(výsledný roztok by měl být světle žlutý).
Okamžitě vložte do zkumavky sterilní vatový tampon.
Rotačním pohybem intenzivně třete vatový tampon o stěnu zkumavky. Rotační pohyb
proveďte nejméně 10x.
Nechte 1 minutu ustát.
Otíráním odběrového tamponu o okraje zkumavky vytlačte z vaty co nejvíce tekutiny.
Odběrový tampon vyhoďte.
Vyjměte kazetový test ze zataveného obalu.
-2-
-
Umístěte kazetu na rovný podklad. Pro každý vzorek i kontrolu použijte novou pipetu
i kazetu. Do oválného okénka značeného šipkou naneste přesně 4 kapky (125μL)
roztoku z testovací zkumavky.
Výsledky odečtěte po 10 minutách.
S
Přidejte 5-6
kapek směsi
Kontrolní zóna výsledková zóna
(4)
Přidejte 5 kapek
reagencie A
Přidejte 5 kaoek
reagencie B
Vložte tampon a
extrahujte z něj
maximum tekutiny
Vyčkejte 10 minut
Interpretace výsledků
modrá
červená
Negativní
červená
Pozitivní
Neplatný
Neplatný
Negativní: V centrálním okénku se v objeví pouze jedna modrá linka v kontrolní zóně
(značená písmenem C)
Pozitivní: Kromě modré linky v kontrolní zóně (C) se ve výsledkové zóně (T) objeví také
jedna červená linka (test line).
Neplatné: Výsledky jsou neplatné při úplné absenci modré linky v kontrolní zóně (C) bez
ohledu na přítomnost červené linky. Nejčastějšími příčinami selhání testu jsou: nedostatečná
koncentrace vzorku, nesprávný pracovní postup nebo poškození reagencií. Zkontrolujte
pracovní postup a opakujte test s novou testovací sadou. Pokud potíže přetrvávají, kontaktujte
svého lokálního dodavatele.
-3-
Poznámky k interpretaci výsledků
Intenzita červeného zbarvení linky ve výsledkové zóně (T) bude kolísat v závislosti na
koncentraci antigenů v testovaném vzorku. Každopádně, tento je test je pouze kvalitativní,
proto z něj nelze určit kvantitu, ani nárůst koncentrace antigenů.
Kontrola kvality
Kontrolní body pracovního postupu jsou zahrnuty v testu:
- Přítomnost modré linky v kontrolní zóně (C) potvrzuje dostatečnou koncentraci
vzorku a správný pracovní postup.
- Při přípravě extrakčního roztoku se po přidání reagencie B změní barva z růžové na
žlutou. Tato barevná změna potvrzuje, že byly reagencie smíšeny správně a že jsou
funkční.
Omezení
-
-
Test musí proběhnout do 2 hodin od otevření zataveného obalu.
Tento test slouží pouze k pravděpodobné diagnóze streptokokové infekce. Potvrzení
infekce musí být provedeno lékařem poté, co byly vyhodnoceny všechny klinické a
laboratorní nálezy.
CerTest-VIDITEST Strep A Card může být použit pouze pro krční výtěry nebo
kolonie odebrané přímo z kultivační misky. Výsledky při použití výtěrů z jiných částí
těla nebo při použití jiných vzorků, jako jsou sliny, hlen nebo moč, nemohou být
uznány platnými. Kvalita testu záleží na kvalitě odebraného vzorku. Vzorky proto
odebírejte s náležitou přesností.
Pomocí tohoto testu nelze rozlišit akutní a chronickou infekci. Pharyngitida může být
způsobena i jinými organismy, než je Streptokok typu A.
Negativní výsledky mohou být získány i z nevhodných vzorků nebo ze vzorků
s nízkou koncentrací antigenu. Doporučujeme potvrdit negativitu testu kultivační
metodou.
Očekávané výsledky
Ačkoliv se může Streptokoková krční infekce objevit v jakémkoliv věku a v kterémkoliv
ročním období, postihuje zejména děti ve školním věku v zimním a jarním období.
Účinnost
Citlivost
V souladu s instrukcemi k použití této sady byly testovány různé inaktivované kultury
Streptokoku typu A v rozličných ředěních.
Detekční limit: 1,9 x 104 CFU/mL
Detekce Streptokoku typu A CerTest-VIDITEST Strep A Card vykazovala ve srovnání
s jinými komerčními rychlými testy >99% citlivost.
Specifita
Detekce Streptokoku typu A CerTest-VIDITEST Strep A Card vykazovala ve srovnání
s jinými komerčními rychlými testy >99% specifitu.
-4-
Uskladnění a funkčnost
Skladujte v původním zataveném obalu při teplotě +2 až +30°C. Test je funkční do data
exspirace uvedeného na obalu. Nezmrazujte.
Bezpečnostní opatření
CerTest-VIDITEST Strep A Card je určen pro profesionální diagnostické využití in vitro.
Nepoužívejte po datu exspirace.
Nepoužívejte součásti testu, pokud byl během skladování poškozen hliníkový obal.
Všechny preparáty musí být brány jako potenciálně nebezpečné a musí s nimi být nakládáno
jako s infekčním materiálem. Pro každý vzorek použijte nový odběrový tampon, abyste
zamezili chybám způsobeným kontaminací.
Po použití musí být test vyhozen do příslušného kontejneru s nebezpečným odpadem.
Roztok“A“ obsahuje 2M dusitan sodný – tato složka soupravy je označena symbolem T –
toxický. Vyvarujte se kontaktu tohoto přípravku s kůží a očima. Přípravek nepožívejte ani
nevdechujte, je toxický při požití a zdraví škodlivý při vdechnutí a kontaktu s pokožkou.
Může způsobit vážné podráždění očí.
Reference
1.
Dos Santos, Ana Gabriele P., Berezin, Fitan N.; Comparative analysis of clinical and laboratory
methods for diagnosing Streptococcal sore throat. J. Pediatr. (Rio J.) 2005; 81 (1): 23-8
2.
Borbeau, Paul P. and Heither, Barbara J.; Use of swab without Transport media for the Gen-Probe
Group A Strep Direct Test. Journal of Clinical Microbiology, July 2004, p. 3207-3211
3.
Petts, D.N.; Evaluation of a modified nitrous acid extraction latex agglutination kit for grouping betahemolytic Streptococci and Enterococci. Journal of Clinical Microbiology, Apr. 1995, p.1016-1018.
4.
Sheeler, Robert P. et al., Accuracy of Rapid Strep testing in patients who have had recent Streptococcal
Pharyngitis. JABFP, July-August 2002, Vol 15 No 4, p. 261-265.
Použité symboly
In vitro diagnostic
device
Batch code
Consult instructions for
use
Catalogue number
Contains sufficient for
<n> tests
Manufacturer
Do not use if package
damaged
Keep dry
Temperature limitation
Use by
Revize: 03/2009
-5-
-6-