Rapid-VIDITEST FOB

Rapid-VIDITEST
FOB
(Jednokrokový kazetový test pro detekci hemoglobinu ve stolici)
Návod k použití soupravy
Výrobce: VIDIA spol. s r.o., Nad Safinou II 365, Vestec, 252 42 Jesenice u Prahy,
Tel: 261 090 565, Fax: 261 090 566, E-mail: [email protected], Web: www.vidia.cz
POUŽITÍ:
Rapid-VIDITEST FOB je jednokrokový imunochromatografický test pro kvalitativní
stanovení lidského hemoglobinu (Hb) ve stolici k detekci gastrointestinálního krvácení.
ÚVOD:
Kolorektální karcinom je nejčastější příčinou onemocnění a úmrtí v hospodářsky vyspělých
zemích. „Screening“ pomocí vyšetřování okultního krvácení je založen na předpokladu, že
nádory tlustého střeva krvácejí (např. časné stádium kolorektálního karcinomu nebo
adenomatózní polypy střeva) a proto mohou být zachyceny testem na okultní krvácení.
Jestliže dochází ke krvácení do gastrointestinálního traktu, obsahuje stolice směs
neporušeného anebo téměř neporušeného hemoglobinu, neporušeného hemu a metabolitů
hemu (porphyrinů) v množstvích, které závisí na místě krvácení, na velikosti krvácení a na
rychlosti průchodu gastrointestinálním traktem. Imunochemické testy, které detekují
neporušený anebo téměř neporušený hemoglobin, jsou specifické pro krvácení do dolních
částí gastrointestinálního traktu, protože krev pocházející z nižších etáží traktu je průchodem
méně degradovaná.
PRINCIP TESTU:
Rapid-VIDITEST FOB je kvalitativní imunochromatografický test pro stanovení lidského
hemoglobinu ve stolici. Na testovacích zónách membrány kazety jsou navázány myší
monoklonální protilátky proti lidskému hemoglobinu.
V průběhu testování vzorek reaguje s barevným konjugátem, který byl předem vysušen v
aplikačním místě membrány (anti - lidské hemoglobinové protilátky- myší monoklonální
protilátka – červené mikrokuličky). Směs barevného konjugátu a vzorku se pohybuje směrem
nahoru přes testovací zóny kapilární vzlínavostí. V případě pozitivního výsledku budou
specifické protilátky imobilizované na testovací zóně membrány vázat barevné částice
konjugátu. Směs se pohybuje dále směrem nahoru do kontrolní zóny, kde jsou imobilizované
protilátky pro kontrolní zónu. V té by se měla vždy objevit zelená linka. Přítomnost zelené
linky ověřuje:
1) že se použil dostatečný objem vzorku
2) že došlo ke správné vzlínavosti vzorku
3) vnitřní kontrolu reagencií.
1
OBSAH SOUPRAVY:
-
Testovací kazety (obsahují jednorázové plastové pipety)
odběrové zkumavky s aplikační tyčinkou obsahující ředicí roztok pro vzorky
návod k použití
certifikát kontroly balení
návod pro pacienta na odběr vzorku stolice, sáček s lištou, štítek
POTŘEBNÝ MATERIÁL NEDODÁVANÝ SE SOUPRAVOU:
-
nádoba na sběr vzorků
jednorázové rukavice
stopky
SBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ:
Vzorky odebírejte do čistých odběrových nádob. Test by měl proběhnout co nejdříve po
odebrání vzorku stolice, pokud to není možné, lze vzorky uchovávat 1 - 2 dny před
testováním v chladničce při +2 až +10°C. V případě delšího skladování, maximálně 1 rok, by
se měly vzorky uchovávat zmrazené při -18 až -28°C. Před použitím vzorky nechte
vytemperovat na laboratorní teplotu.
Příprava vzorků
1) Odšroubujte víčko odběrové zkumavky s ředícím roztokem a pomocí aplikační tyčinky na
víčku odběrové zkumavky odeberte malé množství vzorku stolice (asi 100 mg).
V případě, že je vzorek tekutý, odeberte 100 μl a pipetujte do odběrové zkumavky
(obr. 1).
2) Zašroubováním víčka odběrové zkumavky ponoříte aplikační tyčinku do ředicího roztoku.
Za účelem dobré homogenizace vzorku zkumavku důkladně promíchejte (obr. 2).
Vzorek stolice
(1)
(2)
Odběrová zkumavka
Upozornění:
Vzorky by neměly být odebírány u žen v období menstruace, u pacientů s krvácivými
hemeroidy, u pacientů s nálezem krve v moči a u lidí s narušenou peristaltikou (namáhavé
vyprazdňování).
2
PRACOVNÍ POSTUP:
Před testováním nechte testovací kazetu, vzorek stolice a kontroly vytemperovat na
laboratorní teplotu (+15 až +30°C). Neotvírejte obal, dokud nejste připraveni provést
test.
1. Po vytemperování kazety otevřete obalovou fólii v označeném místě.
2. Znova protřepejte odběrovou zkumavku se vzorkem stolice za účelem dobré
homogenizace vzorku. Uřízněte nebo ustřihněte konec špičky zkumavky (3).
3. Těsně před použitím vyjměte Rapid-VIDITEST FOB test z obalové folie a položte ho na
vodorovnou podložku. Nedotýkejte se membrány v místě testovací zóny a zóny pro
aplikaci vzorku. Použijte samostatnou odběrovou zkumavku a kazetu pro každý vzorek
a kontrolu zvlášť.
4. Přidejte přesně 5 kapek nebo 150 μl naředěného vzorku z odběrové zkumavky do
oválného okénka označeného šipkou (4).
5. Po 5 minutách odečtěte výsledek (objeví se barevné linky).
Aplikujte 5 kapek
roztoku se vzorkem
(4)
(3)
Kontrolní zóna
3
Výsledková zóna
INTERPRETACE VÝSLEDKŮ:
Vzorky se aplikují do oválného okénka označeného S (sample – vzorek), výsledky se
odečítají v obdélníkovém okénku vprostřed kazety označeném C (kontrolní zóna) a T
(výsledková zóna).
Zelená
Červená
Negativní
Červená
FOB Pozitivní
Neplatný
Neplatný
Negativní: Objeví se pouze ZELENÁ linka v místě označeném C (kontrolní zóna). Okultní
krvácení není prokázáno: ve vzorku není přítomnost lidského hemoglobinu.
Pozitivní: Kromě zelené linky v kontrolní zóně C se objeví červená linka ve výsledkové
zóně T.
Neplatný: Test je neplatný, pokud se v kontrolní zóně neobjeví ZELENÁ linka bez ohledu na
to, zda se v zóně výsledku objeví červená linka. Důvodem nepřítomnosti kontrolní linky může
být nedostatečný objem vzorku, nesprávné provedení testu nebo poškození činidel.
Zkontrolujte pracovní postup a opakujte test s novou testovací sadou. Pokud potíže
přetrvávají, kontaktujte svého dodavatele.
Poznámka k interpretaci výsledku:
Intenzita červené barevné linky v místě označeném T závisí na koncentraci lidského
hemoglobinu ve vzorku. Nicméně tímto kvalitativním testem nelze kvantitativně stanovit
množství ani rychlost nárůstu hemoglobinu.
PLATNOST TESTU:
Test je platný pouze v případě, když se v kontrolní zóně objeví zelená linka.
V testu je použit interní standard. Zelená linka, která se objevuje v kontrolní zóně C, je vnitřní
kontrolou testu. Potvrzuje dostatečný objem vzorku a správný průběh testu.
4
OMEZENÍ TESTU:
1. Test musí být proveden do 2 hodin po otevření vzduchotěsného obalu kazety.
2. Nadbytečné množství vzorku stolice může vést k nesprávnému výsledku (objevují se
hnědé linky). V tomto případě je nutné opakovat přípravu vzorku a test.
3. Vzorky by neměly být odebírány u žen v období menstruace, u pacientů s krvácivými
hemoroidy, u pacientů s nálezem krve v moči a u lidí s narušenou peristaltikou (namáhavé
vyprazdňování).
4. Pozitivní výsledek potvrzuje přítomnost lidského hemoglobinu ve stolici, ačkoliv test je
určen pro včasnou diagnostiku kolorektálního karcinomu, může být pozitivní i v jiných
případech, jako jsou krvácející hemoroidy, stavy s přítomností krve v moči nebo iritace
žaludeční sliznice. Pozitivní výsledek by měl vést k dalším vyšetřením ke zjištění zdroje
krvácení a příčiny výskytu krve ve stolici.
5. Negativní výsledek nevylučuje krvácení, protože polypy a kolorektální karcinom může
způsobovat pouze intermitentní krvácení anebo nemusí krvácet během určitých stádií
onemocnění. Krev se může vyskytovat ve stolici nerovnoměrně (může chybět právě jen v
v odebraném vzorku).
ÚČINNOST TESTU:
Citlivost:
Vzorek obsahující lidský hemoglobin v koncentraci ≥ 50 ng/mL vykazuje za použití RapidVIDITEST FOB pozitivní výsledek. V některých případech může být vzorek obsahující méně
než 50 ng/ml také testován jako pozitivní.
Detekční limit testu byl stanoven dle pokynů pro provedení tohoto testu. Hemoglobin byl
různě ředěn přímo v pufru nebo byl smíchán s negativním vzorkem stolice.
Citlivost detekce lidského hemoglobinu pomocí Rapid-VIDITEST FOB testu vykazovala více
jak 99% shodu v porovnání s komerčním guajak testem.
Citlivost detekce lidského hemoglobinu pomocí Rapid-VIDITEST FOB testu vykazovala >
99% shodu v porovnání s jinými komerčními rapid testy (ImmunTech OcculTech (YD
Diagnostics) a Human Hexagon OBTI).
Specificita:
Rapid-VIDITEST FOB je specifický na lidský hemoglobin a nebyla nalezena žádná křížová
reaktivita s bovinním a prasečím hemoglobinem.
Specifita detekce lidského hemoglobinu pomocí Rapid-VIDITEST FOB vykazovala > 99%
shodu s komerčním guajak testem, > 99% shodu s dalšími komerčními rapid testy
(ImmunTech OcculTech (YD Diagnostics) a Human Hexagon OBTI).
Použití myší monoklonální protilátky v Rapid-VIDITEST FOB zaručuje vysoký stupeň
specificity pro detekci lidského hemoglobinu.
5
SKLADOVÁNÍ A STABILITA:
Skladujte v originálním obalu při teplotě +2 až +30°C. Test je stabilní do data exspirace
uvedeného na obalu. Nezmrazujte.
BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ:
-
pouze pro in vitro diagnostiku
nepoužívejte po uplynutí expirační doby
se vzorky manipulujte jako s potenciálně infekčním materiálem
odpad likvidujte jako biologický infekční odpad v souladu s příslušnými předpisy
REFERENCE:
1. Towler BP, Irwig L, Glasziou P, Weller D, Kewenter J: Screening for colorectal cancer
using the faecal occult blood test, Hemoccult. Cochrane Database Syst Rev. 2000;(2):
CD001216.
2. Ransohoff DF and Lang CA: Screening for colorectal cancer with the Fecal Occult Blood
Test: a background paper. Ann Intern Med. 1997; 126: 811-822.
3. Ransohoff DF and Lang CA: Suggested technique for Faecal Occult Blood testing and
interpretation in colorectal cancer screening. Ann Intern Med. 1997; 126: 808-810.
4. Chien-Hua Chiang et al.: „A Comparative Study of Three Fecal Occult Blood Test in
Upper Gastrointestinal Bleeding“. Kaohsiung J. Med. Sci. May 2006, 22; 223-228.
POUŽITÉ SYMBOLY:
Určeno pro diagnostiku in vitro
Číslo šarže (LOT)
Datum exspirace
Výrobce
Poslední revize tohoto návodu: 04/2013
6