Positive cooperativity of strychnine

Přenos signálu muskarinovými
receptory
Oddělení neurochemie, Fyziologický ústav AV ČR
Patologie cholinergního přenosu v CNS
 Poruchy paměti
 Schizofrenie
 Závislost na opiátech
 Alzheimerova choroba
 etc.
Alzheimerova choroba
tg 7m
 Akumulace β-amyloidu,
tg 17m
wt 17m
tvorba amyloidních plaků z
oligomerů β-amyloidu,
neurodegenerace.
 Oslabení cholinergního
NH2
A
APP
přenosu v CNS, což má za
následek 1/ poruchy paměti
a 2/ poruchy metabolismu
APP.
-secretase
out
-amyloid
in
-secretase
COOH
Začarovaný kruh, kde cholinergní přenos hraje klíčovou úlohu.
Cholinergní přenos
Cholinergní přenos – inhibice autoregulace
M2 inhibitor
Cholinergní přenos – inhibice acetylcholin
esterázy
AchE inhibitor
Cholinergní přenos – stimulace
postsynaptických receptorů
allosteric enhancer
selective
agonist
Cholinergní přenos - neuroprotekce
Dieta (nízký cholesterol, DHA, ...)
 Neuroprotekce (antioxidanty, UTP, ...)

Metody
Konveční
Nové
Vazba ligandů
Radioligandy
Fluorescenční ligandy, FRET mezi
ligandem a receptorem
Funkční opověď
Inkorporace/přeměna radioaktivních
prekursorů, vazba [35S]GTPS
Fluorescenční próby, fluorescenčně
značené GTPS
Aktivace
Nepřímá měření
Změny FRET signálu v důsledku
konformačních změn
Lokalizace, regulace
Náročný radioimage, pouze staticky
Jednoduchá fluorescenční
mikroskopie, dynamicky
Metody
Konveční
Nové
Radioaktivní
Fluorescenční
Vysoká citlivost
Nižší citliviost
Kvantifikovatelnost
Obtížná kvantifikovatelnost
Instrumentálně nenáročné
Instrumentálně náročné
Omezená aplikovatelnost
Široké spektrum aplikací
Vysoká cena radioligandů
Levné fluorescenční próby
Statické měření
Dynamické měření
Vazba methoctraminu
Vazba methoctraminu - FRET
Vazba methoctraminu - FRET
Děkuji za pozornost