příloha č. 1 - Jihočeská univerzita v Českých Budějovicích

Příloha 6
Jihočeská univerzita v Českých Budějovicích
Zemědělská fakulta
Provozní řád Biotechnologického centra doplněný podle přílohy č. 4
k zákonu č. 78/2004 Sb.
a) identifikační údaje uživatele
Název organizace: Zemědělská fakulta, Jihočeská univerzita v Českých Budějovicích
Sídlo: Studentská 13, České Budějovice, PSČ 370 05
Identifikační číslo uživatele: 60076658
Děkanka: prof. Ing. Magdalena Hrabánková, CSc.
b) odborný poradce
Jméno: doc. Ing. Vladislav Čurn, Ph.D.
Trvalý pobyt: Vrbová 14, 373 16 Dobrá Voda u Českých Budějovic
tel.: *420-387772588
fax: *420-387772588
e-mail: [email protected]
c) kategorii rizika nakládání s geneticky modifikovaným organismem, které smí být na
pracovišti prováděno
I. kategorie rizika
d) osoba odpovědná za provoz pracoviště
Jméno: doc. Ing. Vladislav Čurn, Ph.D
Trvalý pobyt: Vrbová 14, 373 16 Dobrá Voda u Českých Budějovic
tel.: *420-387772588
fax: *420-387772588
e-mail: [email protected]
e) charakter, účel, popis technických prvků zajišťujících uzavření prostoru
Jednotlivé laboratoře a umývárny jsou uzavřeny dveřmi s klikou, které jsou mimo
pracovní dobu zamčené. Klíče mají pracovníci fakulty ze seznamu v bodu g), kteří dané
prostory využívají. Evidence klíčů je vedena klíčovým režimem fakulty. Tyto místnosti jsou
odděleny od ostatních prostor hygienickou smyčkou.
f) seznam a popis závazných pracovních postupů používaných na pracovišti
Na pracovišti se provádí vědecko-výzkumná a pedagogická práce. Základní přístupy
spočívají v klonování produktů PCR do plazmidových vektorů a jejich následné sekvenování.
Nejčastěji používané plazmidové vektory:
PCR II-TOPO
pCR 2.1-TOPO
Jsou k dispozici jejich kompletní sekvence včetně údajů o regulačních sekvencích a
selekčních markerech ve firemních materiálech. Dále mohou být používány i jiné klonovací
plazmidové vektory podle aktuálních nabídek firem.
Hlavní experimentální postupy spočívají v základních metodách molekulární genetiky
a genového inženýrství, jako jsou izolace genomové DNA, analýza jaderných genomů pomocí
různých DNA markerů (SSR, RAPD, PCR-RFLP, AFLP), analýza rDNA a cpDNA,
1
Příloha 6
Jihočeská univerzita v Českých Budějovicích
Zemědělská fakulta
klonování a sekvenování fragmentů DNA vzniklých výše uvedenými metodami. Southern a
Nothern blotting. Všechny analýzy se provádějí u kulturních i planě rostoucích rostlin a
vláknitých hub. Metodické postupy se obměňují podle typu materiálu a cílů pokusů a jsou
stále inovovány podle nových údajů v odborné literatuře a invence vědeckých pracovníků.
g) seznam pracovníků proškolených pro práci na pracovišti
katedra pícninářství:
doc. ing. Vladislav Čurn, Ph.D.
studenti DSP:
Ing. Tomáš Nix
Ing. Jan Doubrava
Ing. Barbora Kubátová
Ing. Jana Žaludová
Ing. Lenka Hanusová
Ing. Kamila Šťastná
Ing. Martina Beranová
Ing. Veronika Heřmanová
katedra rostlinné výroby:
Ing. Jan Bárta, Ph.D.
Studenti DSP:
Ing. Jan Kubíček
V rámci přípravy odborníků schopných nakládat s GMO bude seznam průběžně
doplňován o studenty doktorského, magisterského (diplomová práce) a bakalářského
programu (bakalářská práce).
h) výčet a přibližné množství geneticky modifikovaného organismu nebo produktu, se
kterým bude na pracovišti nakládáno
Vzhledem k charakteru práce, která je zaměřená pouze na výzkum budou kultivována
pouze malá množství GMO. V případě E. coli se jedná o objemy kultury nepřesahující 3 ml.
Celkový objem kultur za rok nebude přesahovat 1000 ml.
i) organizační a technologické zabezpečení pracoviště
Biotechnologické centrum se nachází v pavilonu mikrobiologie E Zemědělské fakulty
JU v ulici Studentská č. 13 v Českých Budějovicích. V budově se rovněž nachází katedra
anatomie a fyziologie hospodářských zvířat, odd. mikrobiologie. Kromě vědecké práce
pracovníků ZF JU zde probíhají i praktická cvičení. Pavilon je oddělen od ostatních dveřmi
bez kliky. S bakteriemi se bude pracovat v laboratořích 12 a 5. V laboratoři č. 12 je umístěn
flow-box, třepačky, kultivační box a autokláv. V laboratoři č. 5 je flow-box, digestoř,
centrifugy, termobox, horkovzdušný sterilizátor, lednice, mrazáky a váhy. Laboratoře jsou
odděleny od chodby dveřmi s klikou, klíče mají pouze autorizované osoby (pracovníci ZF JU,
studenti, kteří zde pracují na svých diplomových nebo disertačních pracích).
j) opatření pro případ havárie a požáru, včetně havarijního plánu podle § 20
V případě požáru je možno předměty zasažené požárem považovat za zbavené GMO.
V případě vynášení předmětů kontaminovaných GMO během požáru mimo pracoviště
rozhodne vedoucí laboratoře o jejich likvidaci. V ostatních bodech se likvidace požáru nebo
havárie řídí požárním a havarijním plánem.
2
Příloha 6
Jihočeská univerzita v Českých Budějovicích
Zemědělská fakulta
k) povinnosti pracovníků při práci (dodržování pracovních postupů, postup sanitace
prostoru a zařízení po ukončení pracovní činnosti, postup dekontaminace nástrojů,
osobních ochranných prostředků a oděvů)
Pracovníci a studenti DSP uvedení v seznamu byli proškoleni na provádění všech
metod uvedených v odstavci g) provozního řádu. Za dodržování pracovních postupů
v laboratořích Biotechnologického centra je zodpovědný její vedoucí.
Pro práci s GMO je vyhrazený speciální prostor v laboratoři, tento prostor je po
skončení práce dekontaminován 96% etanolem, jednou měsíčně pak 5% Savem (účinná látka
chlornan sodný), kovové nástroje jsou ožíhány plamenem, kultivační sklo je sterilizováno
suchým teplem (180°C po dobu 1,5 h), použitý materiál bude sterilizován v autoklávu (121°C,
přetlak 1,1 MPa po dobu 50 min.) Ochranné oděvy používané v laboratoři s GMO nesmí být
vynášeny z laboratoře a budou se prát jako infekční materiál (samostatný sběr a oddělená
izolovaná přeprava).
l) systém a četnost kontrol prostoru, zařízení a ochranných opatření
Kontroly budou prováděny odborným poradcem paralelně s požární kontrolou
s četností 1x měsíčně.
m) povinnosti pracovníků při údržbě zařízení
Pracovníci údržby mají povinnost používat v při údržbářských pracích v prostorách
pro práci s GMO pláště pro práci s rekombinovanou DNA, které není možno používat mimo
laboratoř pro GMO. Jsou povinni dbát pokynů vedoucího laboratoře.
n) zásady hygieny a bezpečnosti práce v souladu s ustanovením zvláštních právních
předpisů
Pracovníci mají povinnost používat v prostorách pro práci s GMO pláště pro práci
s rekombinovanou DNA, které není možno používat mimo laboratoř pro GMO. Tyto pláště se
musí prát odděleně jako infekční materiál. Každý pracovník při práci s GMO musí používat
rukavice, které jsou likvidovány spolu s odpadem vzniklým po provedení příslušného
experimentu.
o) způsob nakládání s odpady a kontaminovanými materiály a předměty, zejména
postupy zneškodnění geneticky modifikovaného organismu a způsob kontroly jejich
účinnosti
GMO jsou likvidovány autoklávováním ve speciálních plastikových pytlích.
Geneticky modifikované bakterie jsou likvidovány 10% Savem (účinná látka chlornan sodný)
po dobu 30 min. Autoklávování probíhá při teplotě 120°C a tlaku 1,1 MPa po dobu 30 min.
p) seznam povinných pracovních pomůcek a prostředků osobní ochrany s uvedením
činností, ke kterým musí být používány
V laboratoři určené pro nakládání s GMO musí pracovníci používat ochranný plášť,
který nesmí být nošen mimo prostory s rekombinovanou DNA, dále pak gumové rukavice pro
práci s mikroorganismy a elektroforézou DNA.
3
Příloha 6
Jihočeská univerzita v Českých Budějovicích
Zemědělská fakulta
q) zakázané činnosti na pracovišti
V laboratoři je zakázáno jíst, pít a kouřit. Jsou zde povolené pouze činnosti vymezené
provozním řádem v bodu f).
r) zásady vedení evidence o provozu zařízení, prováděné sanitaci a kontrolách
zabezpečovacích prvků
U každého investičně náročného přístroje je sešit, do kterého pracovník zapisuje
datum a hodiny využívání přístroje. Evidence oprav, kalibrace a sanitace přístroje bude
uložena u vedoucího laboratoře.
s) opatření k zabránění vstupu nepovolaných osob
Do laboratoře je možný vstup pouze dveřmi otvíratelnými klíčem. Klíče mají pouze
pracovníci fakulty a studenti DSP, kteří zde pracují na svých disertačních pracích.
t) podmínky pro uvádění GMO do prostředí
Vzhledem k charakteru práce Biotechnologického centra zaměřené pouze na využívání
GMO pro účely sekvenování nebudou GMO uváděny do prostředí.
u) časovém omezení platnosti provozního řádu
Tento dodatek provozního řádu platí
Biotechnologického centra.
do
odvolání
učiněného
vedoucím
Poučení:
Provozní řád musí obsahovat úředně ověřený počet stran, je zakázáno z něho vyjímat nebo
poškozovat jeho jednotlivé listy a musí se uchovávat podle § 19 písm. b).
Tento provozní řád má 4 strany.
4