FV_Příbalová informace

Příbalová informace
GeneProof
Factor V Leiden PCR Kit
In vitro diagnostický zdravotnický prostředek
Souprava je vyrobena v souladu s evropskou Směrnicí Rady 98/79/ES jako in vitro diagnostický zdravotnický prostředek a je určena pro
profesionální použití ve specializovaných klinických a výzkumných laboratořích.
SLOŽENÍ KITU
FV/050
FV/100
50 rxn
100 rxn
MasterMix
FV Leiden
2x450 µl
4x450 µl
Positive Control
FV Leiden
wild type
1x50 µl
1x50 µl
Positive Control
FV Leiden
mutant
1x50 µl
1x50 µl
Positive Control
FV Leiden
heterozygote
1x50 µl
1x50 µl
REF
PODMÍNKY SKLADOVÁNÍ A PŘEPRAVY
Soupravy je doporučené přepravovat a skladovat při teplotách v rozmezí -85 °C až -10 °C. Při dodržení skladovací teploty je souprava
stabilní minimálně do data expirace uvedeného na obalu. Opětovné zmražování a rozmražování složek soupravy může vést ke snížení
kvality detekce.
TECHNICKÁ SPECIFIKACE
Cílová sekvence
DNA sekvence genu pro hemokoagulační faktor V (Leidenská mutace)
Specificita
jednonukleotidová mutace G1691A v exonu 10 (Arg 506 Gln)
Kvalitativní průkaz
mutace přítomna × nepřítomna
Hodnocení
G/G - standardní homozygot (wild type)
A/A - mutantní homozygot
G/A - heterozygot
Typy vzorků
plná krev v EDTA
Kontrola kvality
pravidelně testováno v panelech Externího hodnocení kvality INSTAND e.V.
Příbalová informace
© GeneProof a.s.
1 / 4
www.geneproof.com
PRINCIP METODY
PCR kit je určen pro detekci mutace G1691A genu pro lidský faktor V (Leidenská mutace) metodou real-time polymerázové řetězové
reakce (PCR). Metoda je založena na amplifikaci cílové sekvence a její detekci pomocí alelově specifického signálu fluorescenčně
značených sond. Cílovou sekvencí je jednonukleotidová záměna guaninu za adenin v pozici 1691 (G1691A). Přítomnost alely wild-type
(G1691G) je detekována v kanálu FAM a mutantní alely (A1691A) v kanálu HEX. V případě heterozygotního genotypu (G1691A) je signál
detekován v obou kanálech. Detekční souprava obsahuje Ready to Use MasterMix a využívá technologii “hot start” minimalizující
nespecifické reakce a zajišťující maximální citlivost. Kit je určen pro in vitro diagnostiku.
TECHNOLOGIE GENETICKÉ DIAGNOSTIKY
Příbalová informace
© GeneProof a.s.
2 / 4
www.geneproof.com
NÁVOD K POUŽITÍ
ODBĚR A UCHOVÁVÁNÍ VZORKŮ
Odběr nevyžaduje žádnou speciální přípravu pacienta. Obvykle se odebírá 3 ml periferní krve do zkumavky s EDTA. Po odběru lze krev
uchovávat po dobu 3 dnů v lednici při teplotě +2 °C až +8 °C, pro dlouhodobé skladování vzorky uchovávejte při teplotě -85 °C až -10 °C.
IZOLACE NUKLEOVÝCH KYSELIN
Izolaci nukleových kyselin je možné provádět na trhu dostupnými izolačními soupravami dle protokolů pro izolaci příslušného
klinického materiálu. Výrobce doporučuje následující izolační soupravy:
GeneProof PathogenFree DNA Isolation Kit
croBEE NA16 Nucleid Acid Extraction System
PŘÍPRAVA PCR
1. Do PCR zkumavek napipetujte 18 µl MasterMixu.
2. Do jednotlivých PCR zkumavek přidejte 2 µl izolátu nukleových kyselin vzorku nebo 2 µl Pozitivní kontroly. Výsledný objem reakční
směsi je 20 µl. V průběhu přípravy PCR je nutné všechny složky uchovávat při teplotě +2 °C až +8 °C.
3. Zkumavky uzavřete, krátce zcentrifugujte, vložte do přístroje a nechte amplifikovat dle následujícího PCR profilu.
Při manipulaci s Pozitivní kontrolou/Kalibrátory nebo při práci s klinickým materiálem dbejte zvýšené opatrnosti, při nesprávné manipulaci by mohlo
dojít ke kontaminaci a tím ke znehodnocení složek soupravy nebo MasterMixu! Za znehodnocení soupravy nesprávnou manipulací nebo skladováním
výrobce neručí.
AMPLIFIKAČNÍ PROGRAM
Step
Temperature
Time
1. Hold
95 °C
10 min
95 °C
10 s
64 °C
20 s
72 °C
20 s
2. PCR
Data collection
Cycles
1
FAM+HEX
40
VALIDOVANÉ PŘÍSTROJE
PCR soupravy firmy GeneProof jsou konstruovány tak, aby je bylo možné používat na real-time přístrojích různých výrobců.
Tento PCR Kit byl validován s následujícími přístroji:
Applied Biosystems 7300/7500 Real-Time PCR System
Dx/CFX96™/CFX Connect™ Real-Time PCR Detection System
LightCycler ® 2.0, LightCycler ® 480
LineGene 9600
Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000
SLAN® Real-Time PCR System
StepOne™ Real-Time PCR System
GeneProof diagnostické soupravy průběžně validujeme na různých typech přístrojů. Aktuální přehled si vyžádejte na
[email protected].
Příbalová informace
© GeneProof a.s.
3 / 4
www.geneproof.com
VYHODNOCENÍ ANALÝZY KLINICKÝCH VZORKŮ
Kanál FAM
Kanál HEX
Výsledek
Interpretace
Validní
G/G – standardní homozygot (wild type)
Validní
A/A – mutantní homozygot
Validní
G/A – heterozygot
Nevalidní
UPOZORNĚNÍ
Jediná platná Příbalová informace pro konkrétní soupravu je součástí balení nebo na vyžádání k dané šarži u výrobce.
Soupravu je po použití doporučeno likvidovat podle aktuální právní úpravy s ohledem na skutečnost, že souprava neobsahuje žádné
nebezpečné, infekční nebo toxické látky, které by podléhaly zvláštním bezpečnostním předpisům, a použité obalové materiály jsou
vyrobeny z papíru a z polypropylenu. V případě jakéhokoliv dotazu kontaktujte zákaznický servis.
Zákaznický servis a technická podpora
Tel.:
+420543211679
Fax:
+420516770824
email: [email protected]
Objednávky
Tel.:
+420543211679
Fax:
+420516770824
email: [email protected]
GeneProof a.s.
Vídeňská 119 / CZ-619 00 Brno / +420 543 211 679 / [email protected]
Verze: DOK_145_15_01
Platnost od: 01.09.2015
Příbalová informace
© GeneProof a.s.
4 / 4
www.geneproof.com