Certest Rota-Adeno card

Rapid-VIDITEST
Rota-Adeno
(Jednokrokový kazetový test pro in vitro diagnostiku rotavirů a adenovirů)
Návod k použití soupravy
Výrobce: VIDIA spol. s r.o., Nad Safinou II 365, Vestec, 252 42 Jesenice u Prahy,
Tel: 261 090 565, Fax: 261 090 566, E-mail: [email protected], Web: www.vidia.cz
POUŽITÍ:
Rapid-VIDITEST Rota-Adeno je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro
kvalitativní detekci rotaviru a adenoviru ve stolici.
ÚVOD:
Virová gastroenteritida je infekce způsobené různými viry, které mají za následek zvracení
nebo průjem. Gastroenteritidu může způsobit mnoho různých virů, včetně rotavirů, norovirů,
adenovirů, sapovirů a astrovirů.
Hlavními příznaky virové gastroenteritidy jsou vodnatý průjem a zvracení. Postižená osoba
může mít také bolesti hlavy, horečku a křeče v břiše. Obecně platí, že se příznaky začnou
objevovat 1-2 dny po infekci virem vyvolávajícím gastroenteritidu a může trvat po dobu 1 až
10 dnů v závislosti na tom, který virus je původcem nemoci. Některé výzkumy ukázaly, že
doba trvání příznaků je 3-4 dny. Akutní průjem u dětí mladších dvou let věku je nejčastěji
zapříčiněn rotaviry. Adenoviry a astroviry způsobují průjem většinou u malých dětí, ale
k nakažení může dojít i u starších dětí a dospělých osob.
PRINCIP TESTU:
Rapid-VIDITEST Rota-Adeno je kvalitativní imunochromatografický test pro stanovení
Rotaviru a adenoviru ve stolici. Na testovacích zónách membrány kazety jsou navázány myší
monoklonální protilátky proti virovým antigenům.
V průběhu testování vzorek reaguje s konjugátem (anti-rotavirové protilátky a/nebo
anti-adenovirové protilátky), který byl imobilizovaný na membráně. Směs konjugátu a vzorku
se pohybuje směrem nahoru kapilární vzlínavostí. V případě pozitivního výsledku specifické
protilátky imobilizované na testovací zóně membrány vážou vzlínající částice. V testovací
zóně se objeví jedna nebo dvě barevné linky. Zelená linka se objeví v kontrolní zóně a její
přítomnost ověřuje:
1) že se použil dostatečný objem vzorku
2) že došlo ke správné vzlínavosti vzorku
3) interní kontrolu reagencií.
1
OBSAH SOUPRAVY:
-
Testovací kazety
Odběrové zkumavky s aplikační tyčinkou obsahující ředicí roztok pro vzorky
Návod k použití
Certifikát kontroly balení
POTŘEBNÝ MATERIÁL NEDODÁVANÝ SE SOUPRAVOU:
-
nádoba na sběr vzorků
jednorázové rukavice
stopky
SBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ:
Shromážděte dostatečné množství stolice (1-2 g nebo ml tekutého vzorku). Vzorky stolice by
měly být odebrány do čistých odběrových nádob (žádné konzervační látky nebo přepravní
média). Vzorky lze uchovávat v chladničce (2-8 °C) po dobu 1-2 dnů před testováním.
V případě delšího skladování, maximálně 1 rok, by se měly vzorky uchovávat zmrazené při
-20°C. Před použitím vzorky nechte vytemperovat na laboratorní teplotu.
Příprava vzorků
Pro každý vzorek použijte samostatnou odběrovou zkumavku.
a) Odšroubujte víčko odběrové zkumavky a pomocí aplikační tyčinky na víčku odběrové
zkumavky odeberte malé množství vzorku stolice (cca 125 mg). Zašroubujte lahvičku s
pufrem a vzorkem stolice.
b) Důkladně promíchejte zkumavku za účelem dobré homogenizace vzorku.
c) V případě kapalných vzorků stolice, odsajte fekální vzorek kapátkem a přidejte 125 ul do
odběrové lahvičky s pufrem.
Odeberte vzorek
Promíchejte vzorek
s pufrem
Oddělte špičku
zkumavky
PRACOVNÍ POSTUP:
Před testováním nechte testovací kazetu, vzorek stolice a kontroly vytemperovat na
laboratorní teplotu (15 - 30°C). Neotvírejte obal, dokud nejste připraveni provést test.
1. Těsně před použitím vyjměte kazetu Rotavirus-Adenovirus z obalové folie
2. Znova protřepejte odběrovou zkumavku se vzorkem stolice za účelem dobré
homogenizace vzorku. Oddělte konec špičky zkumavky.
3. Použijte samostatnou odběrovou zkumavku a kazetu pro každý vzorek a kontrolu zvlášť.
Přidejte přesně 4 kapky naředěného vzorku z odběrové zkumavky do okénka pro vzorek
(S- sample/vzorek).
4. Po 10 minutách odečtěte výsledek.
2
Přidejte 4 kapky směsi pufru a vzorku
INTERPRETACE VÝSLEDKŮ: (viz obrázek níže)
Adenovirus
Rotavirus
Adenovirus-Rotavirus
Negativní
Neplatný
Adenovirus pozitivní: V oblasti centrálního okénka se objeví dvě linky. ČERVENÁ linka
v místě označeném T1 a ZELENÁ kontrolní linka v místě označeném C.
Rotavirus pozitivní: V oblasti centrálního okénka se objeví dvě linky. ČERVENÁ linka
v místě označeném T2 a ZELENÁ kontrolní linka v místě označeném C.
Adenovirus-Rotavirus pozitivní: V oblasti centrálního okénka se objeví tři linky. ZELENÁ
linka v místě označeném C, a dvě ČERVENÉ v místě označeném T1 aT2.
Negativní: Objeví se pouze ZELENÁ linka (kontrolní) v místě označeném C .
Neplatný: Test je neplatný, pokud se v kontrolní zóně neobjeví ZELENÁ linka bez ohledu na
to, zda se v zóně výsledku objeví jedna nebo obě červené linky. Důvodem nepřítomnosti
kontrolní linky může být nedostatečný objem vzorku nebo nesprávné provedení testu.
Zkontrolujte pracovní postup a opakujte test s novou testovací sadou. Pokud problém
přetrvává, přestaňte testovací soupravu používat a kontaktujte svého distributora.
POZNÁMKA K INTERPRETACI VÝSLEDKŮ:
Intenzita červené barvy testovacích linek v místech označených T1 a T2 se liší v závislosti na
koncentraci antigenu ve vzorku. Nicméně tímto kvalitativním testem nelze kvantitativně
stanovit množství antigenu ani jeho nárůst v průběhu onemocnění.
PLATNOST TESTU:
V testu je použit interní standard. Zelená linka, která se objevuje v kontrolní zóně je vnitřní
kontrolou testu. Potvrzuje dostatečný objem vzorku a správný průběh testu.
OMEZENÍ TESTU:
1. Rapid-VIDITEST Rota-Adeno pouze naznačuje přítomnost rotavirové a adenovirvé
infekce ve vzorku (kvalitativní detekce) a měl by být použit pouze pro detekci rotavirů a
adenovirů ve vzorku stolice. Tímto kvalitativním testem nelze kvantitativně stanovit
množství antigenu ani zvýšení koncentrace antigenů v průběhu onemocnění.
2. Nadbytečné množství vzorku stolice může vést k nesprávnému výsledku (objevují se
hnědé linky). V tomto případě je nutné opakovat přípravu vzorku a test.
3
3. Některé vzorky stolice mohou snížit intenzitu kontrolní linie.
4. Pokud je výsledek testu negativní a klinické symptomy přetrvávají, doporučuje se provést
jiný test za použití jiných klinických metod. Negativní výsledek nemusí kdykoli vyloučit
možnost infekce rotavirem a adenovirem.
5. Tento test pouze naznačuje přítomnost rotavirové a adenovirové infekce. Lékař by měl
diagnózu stanovit až po laboratorním a klinickém potvrzení infekce.
OČEKÁVANÉ VÝSLEDKY:
Každý rok je v USA hospitalizováno v nemocnici asi 70000 dětí nakažených rotavirovou
infekcí, odhadem 160000 dětí mladších než 5 let navštíví pohotovost a 1,5 mil. dětí se objeví
v ordinacích lékařů. Odhaduje se, že v USA umírá každý rok 100 dětí v důsledku komplikací
způsobených rotavirovou infekcí.
Rotavirus postihuje populaci ve všech socioekonomických skupinách a je stejně rozšířená ve
vyspělých i rozvojových zemích, takže není pravděpodobné, že na výskyt infekce mají vliv
sanitární či zásobovací postupy v daných oblastech.
Rotavirové infekce se objevují v USA v podzimních měsících na jihozápadě a do jara se pak
přesouvá na severovýchod, takže infekce jsou nejčastější v průběhu zimních měsíců.
Nicméně, rotavirová infekce se může objevit kdykoliv během roku.
Adenoviry způsobují průjem většinou u malých dětí, ale můžou postihnout i starší děti a
dospělé osoby. Adenovirové infekce se vyskytují v průběhu celého roku..
ÚČINNOST TESTU:
Vyhodnocení bylo provedeno porovnáním výsledků získaných pomocí Rapid-VIDITEST
Rota-Adeno a jiného komerčně dostupného rotarovirového membránového testu (Ridascreen
® Rotavirus ELISA test, r-Biopharm) a Adenovirus byl potvrzen pomocí PCR.
Rapid-VIDITEST Rota-Adeno je vysoce specifický pro detekci rotaviru (98%) a pro detekci
adenoviru (>99%). Byla též zjištěna vysoká citlivost, pro detekci rotaviru (> 99%) a pro
detekci adenoviru (> 99%) ve srovnání s výsledky komerčního membránového testu.
Použití myších monoklonálních protilátek při výrobě Rapid-VIDITEST Rota-Adeno zajišťuje
vysoký stupeň specificity pro detekci těchto virů.
Křížová reaktivita
Bylo stanovena křížové reaktivita testu Rotavirus-Adenovirus. Křížová reaktivita nebyla
zaznamenána u níže uvedených běžných gastrointestinálních patogenů, jiných organismů a
látek, které se občas vyskytují ve stolici:
Astrovirus
Salmonella spp.
Helicobacter pylori
Enterovirus
Clostridium difficile
Staphylococcus aureus
Norovirus
Giardia lamblia
Entamoeba hystolitica
Campylobacter spp.
Shigella spp
Listeria monocytogenes
Escherichia coli
Cryptosporidium parvum
4
SKLADOVÁNÍ A STABILITA:
Skladujte v originálním obalu chlazené nebo při laboratorní teplotě (2 - 30°C). Test je stabilní
do data expirace uvedeného na obalu. Test musí zůstat v uzavřeném obalu až do použití.
Nezmrazujte.
BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ:
-
Pouze pro in vitro diagnostiku
Nepoužívejte po uplynutí expirační doby
Test by měl zůstat v uzavřeném obalu až do použití
Nepoužívejte test, pokud je sáček poškozen
Dodržujte zásady správné laboratorní praxe, používejte ochranný oděv, ochranné
rukavice, nejezte, nepijte a nekuřte
Se vzorky manipulujte jako s potenciálně infekčním materiálem
Odpad likvidujte v souladu jako biologický infekční odpad v souladu s příslušnými
předpisy
Test musí být proveden do 2 hodin od otevření sáčku
REFERENCE:
1. SILVA DE OLIVEIRA, CONSUELO; LINHARES, ALEXANDRE C. et al., “Rotavirus:
clinical features and prevention”, Jornal de Pediatria - Vol. 75, Supl.1, 1999.
2. GUILLERMO BERNAOLA, WALTER LUQUE. et al., “Fisiopatología de las
Infecciones por Adenovirus”, Paediatrica Asociación de Médicos Residentes del Instituto
de Salud del Niño Oct. 2001 - Mar. 2002 Volumen 4, Nº 2 Págs. 41 - 47.
POUŽITÉ SYMBOLY:
Určeno pro diagnostiku in vitro
Číslo šarže (LOT)
Datum expirace
Výrobce
Poslední revize tohoto návodu: 04/2014
5