Alfa feta protein

BODITECH MED INC.
i-CHROMA AFP-25
+2 až +8 °C
Výslovné a mlčky předpokládané záruky BodiTech Med (včetně
záruk koupěschopnosti a způsobilosti)
jsou podmíněny
dodržováním směrnic vydanými BodiTech Med s ohledem na
použití BodiTech Med výrobků.
Detektorový pufr
+4 až +30 °C
Testovací kazety
BodiTech Med Incorporated
#3-2 Bioventureplaza, 198-60 Hupyongdong
Chuncheon, Kangwon-do 200-160
Republic of Korea
18 měsíců od data výroby
EXP
Fax: +82 (33) 258-6889 www.boditech.co.kr
EC
REP
Jai Jun Choung, Ph.D.
Distribuce:
EU Biotech Development Ltd.
81 Oxford Street, LONDON, W1D 2EU
United Kingdom
Tel: +44 207 903 5441
Fax: +44 207 903 5333
EXBIO Olomouc s.r.o.
Ovesná 14
779 00 Olomouc, Česká republika
Tel.: +420 587 301 011
[email protected]
SYMBOLY
E-Mail: [email protected]
Značka CE
i-CHROMATM je registrovanou obchodní značkou BodiTech
Med Incorporated.
Revize číslo: 02
IVD
Diagnostický zdravotnický prostředek in vitro
REF
Katalogové číslo
Spotřebujte do (exspirace)
Datum poslední revize: květen 08, 2009.
EC
REP
Zplnomocněný zástupce pro Evropské společenství
Skladujte při (omezení teploty)
Sledujte návod k použití
BodiTech Med Inc.
LOT
Číslo šarže
Výrobce
Rev. 02_090508_M
BODITECH MED INC.
i-CHROMATM AFP
Imunoanalytická souprava pro kvantitativní stanovení
alfa-fetoproteinu (AFP) v lidské plné krvi, séru nebo
plazmě pomocí i-CHROMATM Readeru.
POUŽITÍ
i-CHROMATM AFP test společně s i-CHROMATM Readerem je
fluorescenční imunoanalýza, která měří AFP v plné krvi, séru nebo
plazmě.
i-CHROMA AFP-25
SLOŽENÍ DIAGNOSTIK
i-CHROMATM AFP test se skládá z testovací kazety a
detektorového pufru. Testovací kazeta je balena jednotlivě v sáčku
z hliníkové folie s desikantem, detektorový pufr je balen a zasílán
odděleně od testovací kazety .
• Testovací kazeta obsahuje testovací proužek s imobilizovanou
myší monoklonální protilátkou proti lidskému AFP a kontrolní
proužek s imobilizovaným králičím IgG.
• Detektorový pufr obsahuje fluoresceinem značenou anti-AFP
protilátku (myší monoklonální), fluoresceinem značenou antikráličí IgG protilátku, BSA jako stabilizátor a azid sodný jako
konzervans.
UPOZORNĚNÍ A VAROVÁNÍ
• IVD Pouze pro diagnostické použití in vitro.
ÚVOD
Alfa-fetoprotein (AFP) je α1 – globulin ze skupiny lidských
plazmatických proteinů, glykoprotein s molekulární vahou
přibližně 70 kDa. AFP je produkován primárně játry
vyvíjejícího se fétu. Může se objevit i v krvi matky a
amniové tekutině, protože je sekretován do fetálního séra.
Koncentrace AFP u zdravých jedinců je pod 15 ng/ml, avšak
vykazuje vysoké zvýšení při některých maligních
onemocněních, nejčastěji u hepatocelulárního karcinomu a u
non-seminomového karcinomu varlat. U 70 – 90% pacientů
s primárním hepatocelulárním karcinomem a nonseminiomovým karcinomem varlat byla pozorována vysoká
hladina AFP v séru. Vysoké hladiny sérového AFP byly
nalezeny i u omezeného počtu pacientů s diagnózou různých
onemocnění jako jsou rakovina gastrointestinálního traktu,
virová hepatitida, chronická aktivní hepatitida, alkoholová
cirhóza, adenokarcinomy plic, pankreatu a žlučníku. Jelikož
AFP je
důležitým prognostickým ukazatelem nonseminomové rakoviny varlat, hraje velmi důležitou roli
v monitorování klinického stavu a hodnocení pacientů po
terapii.
PRINCIP
i-CHROMATM AFP test je založen je založen na fluorescenční
imunoanalytické technice. i-CHROMATM AFP test používá
sendvičovou imunodetekční metodu, kdy se detektorový pufr
smíchá v testovací lahvičce se vzorkem krve. Pufr obsahuje
fluoresceinem značenou detektorovou anti-AFP protilátku, která se
váže na AFP antigen ze vzorku krve. Jakmile je směs vzorku
vložena do jamky pro vzorek v testovací kazetě, pohybuje se
nitrocelulózovou matricí testovacího proužku pomocí kapilárního
jevu, komplexy detektorové protilátky a AFP jsou zachyceny ke
druhé sendvičové anti-AFP protilátce, která je imobilizována v
testovacím proužku. Čím více je AFP antigenu ve vzorku krve, tím
více komplexů je akumulováno v testovacím proužku. Intenzita
signálu fluorescence detektorové protilátky odráží množství
zachyceného AFP a přes mikroprocesor i-CHROMATM Readeru se
zobrazí koncentrace AFP ve vzorku krve. Standardní výsledné
jednotky i-CHROMATM AFP testu jsou zobrazeny v ng/ml iCHROMATM Readerem. Pracovní rozpětí i-CHROMATM AFP
testu je 5 – 350 ng/ml, detekční limit je 5 ng/ml.
Rev. 02_090508_M
• Pečlivě sledujte pokyny a postupy popsané v tomto příbalovém
letáku. REF Katalogové číslo i-CHROMATM AFP-25
• Nepoužívejte testovací kazetu v případě, že číslo šarže nesouhlasí
s ID čipem, který se vkládá do přístroje.
• i-CHROMATM AFP testovací set je určen pouze pro práci s iCHROMATM Readerem. Test by měl používat pouze vyškolený
personál pracující v laboratořích, ve kterých jsou odebírány
vzorky krve kvalifikovaným lékařským personálem.
• LOT Nepoužívejte materiál vyměněný z jiných šarží nebo po
uplynutí exspirační doby. Používání zdravotnických
prostředků po uplynutí exspirační doby může mít vliv na
výsledek testu.
• i-CHROMATM AFP testovací kazeta musí zůstat ve svém
původním obale až do doby použití. Nepoužívejte
testovací kazetu v případě, že je sáček porušen nebo
poškozen. Po použití odstraňte do odpadu.
• AFP testovací kazeta a reader se musí používat z dosahu vibrací a
magnetického pole. Běžné použití zařízení i-CHROMATM AFP
zahrnuje i nepatrnou vibraci v normálních mezích.
Používejte jednotlivé čisté pipety a odběrové lahvičky pro různé
vzorky. Pipetovací špičky a lahvičky pro vzorek se
používají pouze pro jeden vzorek. Po použití je odstraňte
do odpadu.
• Vzorky krve, testovací kazety, pipetovací špičky a odběrové
lahvičky jsou potenciálně infekční. Vhodná technologie
pro bezpečnost v laboratoři, postupy pro zacházení a
odstraňování do odpadu se musí provádět v souladu se
standardními postupy a příslušnými pravidly platícími pro
mikrobiologický rizikový materiál.
• Test by se měl používat v rámci běžné klinické praxe a nikoliv v
urgentních situacích.
• Nekuřte, nejezte a nepijte na místě, kde pracujete se vzorky nebo
diagnostiky ze setu.
SKLADOVÁNÍ A STABILITA
• Detektorový pufr skladujte v ledničce při 2° - 8°C. Detektorový
pufr je stabilní po dobu 18 měsíců.
BODITECH MED INC.
i-CHROMA AFP-25
• Po vyjmutí z ledničky ponechejte detektorový pufr před
testováním vytemperovat 30 minut při pokojové teplotě.
• Kazety i-CHROMATM AFP testu skladujte při 4°-30°C v
původních obalech. i-CHROMATM AFP testovací
kazety jsou stabilní po dobu 18 měsíců (ponechány v
původních obalech), při skladování při 4°-30°C.
Pipeta pro přenesení (velikost 10 µl, 20 µl, 75µl)
POSTUP
• Obrázek testovací kazety
• Pokud jsou skladovány v ledničce, ponechejte testovací kazety v
původním obalu po dobu minimálně 30 minut vytemperovat na
teplotu místnosti.
• Nevyndávejte kazetu z původního obalu, dokud nebudete
připraveni na testování. Kazeta by se měla použít ihned po
otevření.
• Skladování a doprava testovací soupravy musí vyhovovat
podmínkám uvedeným v návodu.
okénko
1.
Položte testovací kazetu na čistou bezprašnou plochu.
2.
Zkontrolujte/zasuňte ID čip do přístroje. Ujistěte se, že souhlasí
číslo testovací kazety s číslem uvedeným na čipu.
3.
Vyjměte z ledničky zkumavku obsahující detektorový pufr a
ponechejte 10 minut při pokojové teplotě.
4.
Odeberte 30 µl plné krve (15 µl séra, plazmy nebo kontroly) a
pipetou ji přeneste a přidejte do zkumavky s detektorovým
pufrem.
5.
Vzorek s detektorovým pufrem řádně promíchejte poklepem
nebo převrácením zkumavky.
6.
Napipetujte 75 µl směsi vzorku a přeneste ji do jamky
v testovací kazetě.
7.
Před vložením kazety do nosiče ponechejte testovací kazetu 15
minut při pokojové teplotě.
8.
Pro začátek skenování vložte testovací kazetu do nosiče přístroje
i-CHROMATM Readeru a stiskněte „SELECT“. Zkontrolujte
směr testovací kazety a zatlačte kazetu dovnitř nosiče.
Zařízení automaticky odečte testovací kazetu.
9.
Výsledeky odečtěte z obrazovky i-CHROMATM Readeru.

Viz i-CHROMATM Reader Návod na použití s kompletní
mi pokyny na použití readeru.
ODBĚR VZORKŮ A PŘÍPRAVA
Test je možno provést se sérem, plazmou nebo plnou krví.
• Pro získání vzorku séra odeberte krev do zkumavky bez
antikoagulancia a nechte vysrážet. Odeberte sérum ze sraženiny
co možná nejdříve, aby se zabránilo hemolýze. Pro získání
vzorku plazmy odeberte krev do zkumavky s EDTA. Jiná
antikoagulancia než EDTA se pro vzorek plazmy nedoporučují.
Pokud testování nemůže být provedeno do jedné hodiny po
odběru, sérum/plazma by měly být skladovány při -20o C až do
doby testování. Plná krev se musí použít pro otestování ihned.
• Před otestováním se musí vzorek vytemperovat na pokojovou
teplotu a být homogenní. Zamražené vzorky se musí zcela
rozmrazit, jemně promíchat a před otestováním vytemperovat na
pokojovou teplotu. V případě transportu vzorků, měly by být
zabaleny v souladu s požadavky.
• Doporučuje se, pokud je to možné, nepoužívat silně hemolytické
vzorky. Jestliže je vzorek silně hemolytický, měl by se odebrat a
otestovat nový vzorek.
jamka pro vzorek
REF Katalogové číslo 7400
DODÁVANÝ MATERIÁL
VÝSLEDEK
BodiTech Med Inc. i-CHROMATM AFP test
TM
REF Katalogové číslo i-CHROMA
AFP-25
i-CHROMATM Reader vypočítá výsledky AFP testu automaticky
a zobrazí na obrazovce koncentraci AFP v ng/ml. Pro další
informaci viz Návod na použití i-CHROMATM Readeru.
Kit OBSAHUJE:
Testovací kazety
25ks/balení
Detektorový pufr
25 zkumavek(500 µl/zkumavka)
ID Čip
1/balení
Návod
1/balení
MATERIÁL POŽADOVANÝ, ALE NEDODÁVANÝ
i-CHROMATM Reader REF Katalogové číslo 7400
Termotiskárna
Rev. 02_090508_M
KONTROLA KVALITY
Kontrola kvality
 Aby se ověřily očekávané výsledky QC, ověřila se platnost
zkoušky a zajistila se přesnost výsledků u pacientů, měla by se
provádět jako součást správné laboratorní praxe kontrola kvality
používající komerčně dostupné kontroly. Chcete-li provést
kontrolu kvality testovacího setu, doporučujeme použít Abbott
Axsym Control jako kontrolu.
 Kontrola kvality by se měla provádět v pravidelných intervalech
a před použitím každého nového setu, kontroly se testují pro
potvrzení postupu testu a pro ověření, že test dává očekávané
výsledky kontroly kvality. Vzorky kontroly kvality by se měly
použít vždy, kdykoliv se vyskytne jakákoliv pochybnost týkající
se platnosti získaných výsledků. Po potvrzení očekávaných
BODITECH MED INC.
výsledků je testovací přístroj připraven pro použití se vzorky
pacientů. Kontrolní standardy nejsou součástí setu. Pro informaci
jak získat kontroly, kontaktujte EXBIO Olomouc s.r.o.
i-CHROMA AFP-25
Přesnost i-CHROMATM AFP testovacího setu
AFP
Intra-assay
Inter-assay
Postup kontroly
 Každá i-CHROMATM AFP testovací kazeta má interní
kontrolu, která splňuje požadavky rutinní kontroly kvality. Tato
vnitřní kontrola se provádí vždy, jakmile je testován vzorek
pacienta. Tato kontrola potvrzuje, že testovací kazeta byla
vložena a správně odečtena
i-CHROMATM Readerem.
Neplatný výsledek interní kontroly kvality způsobí varovné
hlášení na i-CHROMATM Readeru, který ukáže, že test se musí
opakovat.
• Výsledky i-CHROMATM AFP testu by se měly hodnotit
společně se všemi dostupnými klinickými a laboratorními údaji.
V případě, že výsledky AFP testu nesouhlasí s klinickým
hodnocením, musí se provést další testy.
• Falešně pozitivní výsledky včetně křížových reakcí s některými
složkami séra pacientů s protilátkami zahrnují i nespecifickou
adhezi některých složek lidské krve, které mají podobné epitopy
pro zachycení detektorových protilátek. V případě falešně
negativních výsledků se jedná o tyto nejběžnější příčiny:
antigeny nereagující s protilátkami vzhledem k maskování
epitopů jistými neznámými složkami v krvi, takže antigen
nemůže být rozeznán protilátkou; nestabilita AFP antigenu, která
je výsledkem degradace v čase nebo tepelné degradace, takže již
není rozpoznatelný pro protilátky; a degradované další složky
testu. Účinnost testu je nejvíce závislá na jeho skladování a na
zpracování vzorků za optimálních podmínek.
• Plazma získaná použitím jiných antikoagulants než EDTA (tj.
heparinu nebo citrátu) není vhodná pro i-CHROMATM AFP test
a tak nemůže být použita.
• I jiné faktory mohou ovlivnit i-CHROMA TM AFP test a mohou
způsobovat chybné výsledky. Tyto faktory zahrnují technické
nebo procesní chyby, podobně jako látky přidané do vzorku krve.
Průměr S.D CV%
20
21 1.2 5.7
22
1.3 5.9
50
53
52
3.8 7.3
200
202 6.2 6.2
3. Přesnost: Pro stanovení intra-assay přesnosti byl testován každý
kontrolní vzorek 20 krát. Pro stanovení inter-assay přesnosti byly
testy prováděny deset po sobě následujících dnů, 10 sérií denně
a každá koncentrace AFP 10 krát.
Rev. 02_090508_M
205 11.1 5.4
250
Y=0.90826x-4.43243
R=0.98907
SD=9.90543
200
150
100
50
0
50
100
150
200
250
Abbott Axsym AFP(ng/ml)
VLASTNOSTI TESTU
2. Specifita: K testovanému vzorku byly přidány látky jako např.
Hb, CEA, AFP, ALT, Troponin I, CK-MB, albumin a sérový
amyloid P ve vyšším množství, než je jejich fyziologická
hodnota v normální krvi. Nebyl zjištěn žádný signifikantní vliv
na měření AFP a ani žádná signifikantní zkřížená reaktivita s
testovanými biologickými látkami.
3.5 6.6
S.D CV%
5. Srovnatelnost: Koncentrace AFP 30 klinických vzorků byla
kvantifikována nezávisle na sobě i-CHROMATM AFP Testem
a automatickým analyzátorem Axsym (Abbott). Pro iCHROMATM AFP Test byla použita plná krev a pro Abott
Axsym bylo použito sérum. Výsledky byly porovnány a jejich
kompatibilita byla porovnána lineární regresí a korelačním
koeficientem (R). i-CHROMATM AFP Test byl
dobře
srovnatelný s jinou metodou (R=0.989).
0
1. Analytická citlivost: Analytická citlivost znamená nejnižší
koncentraci AFP, kterou může testovací systém detekovat s
CV<10%. Analytická citlivost i-CHROMATM AFP testu byla
stanovena 10-násobným testováním tří šarží diagnostik.
Analytická citlivost i-CHROMATM PSA testovacího systému
byla 5 ng/ml.
Průměr
4. Linearita: Vysoká hodnota byla naředěna velmi nízkou pro
získání následujících konečných procent; 100%, 75%, 50%, 25%,
10%, 5% a 0%. Vzorky s jednotlivými hodnotami AFP byly
testovány 3 krát. Koeficient lineární regrese byl R=0.997.
Linearita i-CHROMATM AFP testu byla 5-350 ng/ml.
i-CHROMA AFP(ng/ml)
OMEZENÍ TESTU
(ng/ml)
REFERENCE
1.
Tartarinov, Y.S. Detection of embryospecific alpha-globulin in the
blood sera of patients with primary liver tumor. Vopr. Med. Khim.
10:90-91 (1964).
2.
Mcintire, K.R., Waidmann, T.A., Moertel, C.G. and Go, V.L.W.
Serum alpha-fetoprotein in patients with neoplasms of the
gastrointestinal tract. Cancer Res. 35:991-996 (1975).
3.
Javadpouf, N., Mcintire, K.R. and Waidmann, T.A. Human chorionic
gonadotropin (HCG) and alpha-fetoprotein (AFP) in sera and tumor
cells of patients with testicular seminoma. Cancer 42:2768-2772.
(1978).
4.
Chen, D.S. and Sung, J.L. Relationship of Hepatitis B Surface
Antigen to serum alpha-fetoprotein in nonmalignant diseases of the
lever. Cancer 44:984-992 (1979).
5.
Rhoslati,E. and Seppala, M. studies of carcinofetal proteins: Physical
and Chemical Properties of Human alpha-fetoprotein. Int. J. Cancer
7:218-225 (1971).
6.
Abelev,G.I. Alpha-fetoprotein in oncogenesis and its association with
malignant tumors. Adv. Cancer Res. 7:295-358 (1971).
7.
Wespic, H.C. Alpha-fetoprotein: its quantification and relationship to
neoplastic disease, ppp 115-129 In Alpha-fetoprotein, Laboratory
Procedures R (eds.), Masson Publishing, New York (1981) After
Radical Prostatectomy. J. Urol. 142:1082-90 (1989).