ZDE - ČSSFG

1.4.2010
vzdělávací seminář Československé společnosti pro forenzní genetiku
přednášející:
Halina Šimková, expertka Kriminalistického ústavu Praha, viceprezidentka ČSSFG
co je FORENZNÍ GENETIKA
jaké jsou obecné PRINCIPY GENETICKÉ IDENTIFIKACE OSOB a
jaké jsou PRINCIPY ZJIŠTĚNÍ BIOLOGICKÉHO
PŘÍBUZENSKÉHO VZTAHU OSOB
proč je INDIVIDUALITA velmi komplexní pojem
s jakými PŘIROZENÝMI ODCHYLKAMI od základního konceptu
individua se můžeme setkat a jaký to má důsledek v
oblasti genetické identifikace
jak mohou některé LÉKAŘSKÉ ZÁKROKY MĚNIT GENETICKOU
IDENTITU OSOB
Zdroje ilustrací:
punchstock.com, virtualmedicalcentre.com, Alex Tsiaras, volné web zdroje
KRIMINALISTICKÁ
IDENTIFIKAČNÍ
KOGNATIVNÍ
Analýza DNA z
biologických stop a
další specifické analýzy
Identifikace osob
živých i mrtvých
Stanovení biologických
příbuzenských vztahů
1
1.4.2010
Biomolekulární
archeologie
Analýza DNA z
archeologického
materiálu
Genogenealogie
Genogeografie
Pátrání po rodovém
příbuzenství
Pátrání po evolučně
geografickém původu
SLOVNÍČEK:
Gen = funkční (exprimovaný) úsek DNA
Lokus = jakýkoli úsek či místo v DNA
Marker = znak DNA užívaný při testování
Alela = konkrétní varianta(forma)
genu/lokusu/markeru
Polymorfismus = existence více alel
v témže genu/lokusu/markeru
Lidský genom
cca 3 miliardy nukleotidů (2x)
max 10% kódující (geny), 90% nekódující
max 23 tisíc genů
Nepolymorfní
gen/lokus/marker
Nízce polymorfní
gen/lokus/marker
Vysoce polymorfní
gen/lokus/marker
2
1.4.2010
GENETICKÝ
PROFIL
Vysoce polymorfní lokus 1
Vysoce polymorfní lokus 2
Vysoce polymorfní lokus 3
Vysoce polymorfní lokus 4
Vysoce polymorfní lokus 5
1986
VNTR
2000
STR
201X?
SNP
čím polymorfnější lokusy testuji a čím více jich otestuji, tím menší je
pravděpodobnost, že u dvou nepříbuzných osob zjistím zcela
identickou sestavu alel ve všech testovaných lokusech
od určité hranice už považuji tuto pravděpodobnost za limitně
blízkou nule a osobu považuji za INDIVIDUÁLNĚ IDENTIFIKOVANOU
3
1.4.2010
GENETICKÝ
PROFIL
Vysoce polymorfní lokus 1
Vysoce polymorfní lokus 2
Vysoce polymorfní lokus 3
Vysoce polymorfní lokus 4
Vysoce polymorfní lokus 5
u vztahu RODIČ – DÍTĚ mohu dosáhnout
vyloučení na 100%
u ostatních biologických příbuzenských
vztahů většinou ne, pracuji pouze s nějakou
mírou pravděpodobnosti – porovnávám
pozorovanou míru shody dvou profilů s
očekávanou mírou shody za platnosti dané
hypotézy (např. že osoba A je bratranec
osoby B)
v určitých situacích mohu i u takovýchto
vdálenějších vztahů vylučovat na 100% ,
provedu-li analýzu maternálních (mtDNA)
či paternálních (Y-chrz) znaků
4
1.4.2010
= psychické „já“ –
vnímání sebe sama
= fyzické „já“ –
prostorově
ohraničený jedinec
= genetické „já“ –
soubor všech buněk
původem z 1 zygoty
+
in vivo fertilizace
in vitro fertilizace
vzniká
psycheta
diferenciace
vzniká
rameta
5
1.4.2010
pokud neplatí toto,
je to práce pro
psychiatra
pokud neplatí toto,
je to práce pro
genetika
JEDNOVAJEČNÁ
X-ČATA
vznikají dvě
(či více)
ramet
6
1.4.2010
genetický profil
je u nich identický
analýzou DNA nelze
mezi nimi rozlišit
v budoucnu možná přijdou
ke slovu:
somatické mutace
pohyb transpozibilních
elementů v DNA
analýzou DNA nelze
mezi nimi rozlišit a
tedy nelze udělat
např. paternitní test
Nelze zjistit, které
Může to být ale ještě
děti jsou čí…
?
horší…
Geneticky
to nejsou
bratranci a
sestřenice,
ale úplní
sourozenci
7
1.4.2010
Lakshmi
Tatma
Abby &
Brittany
Hensel
vznikají dvě neúplně
oddělené ramety
VÍCEVAJEČNÁ
X-ČATA
stupeň genetické příbuznosti
stejný jako u úplných sourozenců,
ale jsou si fenotypově podobnější
(společný vliv prostředí)
vzniká adekvátní
počet ramet
frekvence dramaticky vzrostla se zavedením technik IVF
8
1.4.2010
Héraklés a Ifiklés
klasický případ, 1982
první spolehlivě doložená
znalost existence tohoto
jevu
John Archer, praktický
lékař (USA), poprvé popsal
HS v r. 1810, vedl evidenci
případů (publikováno v
Williams Obstetrics, 1980)
Koen & Tuen Stuart,
*1993, Nizozemí
Počati IVF technikou, k
pipetování spermatu
omylem použita již jednou
použitá pipeta
TETRAGAMETICKÁ
CHIMÉRA
vzniká jediná rameta
většinou je KRYPTICKÝ (= skrytý)
zjistí se náhodou
někdy lze najít drobné projevy
9
1.4.2010
CO KDYŽ ALE SPLYNOU XX A XY BUŇKY?
XY
intersex
XX
pravý
hermafrodit
ovotestes
vaječníky + varlata
splynutí
genet
mutace
spolehlivě doloženo cca 40 případů
(špička ledovce)
předpoklad zvýšeného rizika u IVF
vzájemná imunotolerance obou linií
Karen Keegan (UK)
Lydia Fairchild
(USA)
10
1.4.2010
CHIMERICKÁ
DVOJČATA
FFTS
anastomózy
vznikají ramety
buňky plodu během
těhotenství osidlují tělo
matky a obráceně
z forenzně genetického
hlediska je to
potenciálně velmi
zajímavé
zásadní význam z
hlediska medicíny –
souvislost s imunitními
funkcemi
vnesení cizorodé buněčné linie do organismu
může mít dočasný nebo trvalý charakter (podle toho, zda vnesená
linie v organismu perzistuje nebo ne – někdy ale těžko odhadovat)
týká se především vnesení biologického materiálu jiné osoby, ale v
budoucnu i vnesení linií jiných organismů (xenotransplantáty)
11
1.4.2010
DNA pouze v leukocytech – záleží tedy na
typu derivátu!
Při transfúzi je materiál vybírán na základě
kompatibility „krevních skupin“, tj.
erytrocytárních antigenů AB0 a Rh systému
= žádná souvislost s identifikačním DNA
profilem
po transfúzi se v krvi objeví smíšený DNA profil
postupně se „vyředí“ a vrátí se k původnímu čistému
profilu pacienta… tedy…. měl by… 
Týká se všech allotransplantací (vyjma
těch, kde je dárcem MZ dvojče)
Při transplantaci je materiál vybírán
na základě kompatibility tkáňových
antigenů HLA systému = žádná
souvislost s identifikačním DNA
profilem
DNA profil dárce se vyskytuje v
transplantovaném orgánu a dále ve
všech tkáních, do nichž penetrují
buňky z tohoto orgánu
forenzně geneticky nejzávažnější
důsledek má allotransplantace kostní
dřeně (BMT)
profil dárce se vyskytuje v čisté formě
v krvi, ve smíšené podobě s profilem
pacienta pak např. v bukálním stěru
v principu může dojít k závažným
omylům – falešně negativní/pozitivní
identifikace osoby
řešením by byl pouze regist
„koexistujících DNA profilů“ – zatím
eticky problematické
12
1.4.2010
FG je aplikovaná vědní disciplína, užívající analýzu DNA k
objasnění či dokázání nějaké věci
má právní (kriminalistické, občansko-právní…) i neprávní
(archeologie, DNA-genealogie…) oblasti uplatnění
většina forenzních genetiků v ČR sdružena v Československé
společnosti pro forenzní genetiku (ČSSFG) – řada oblastí působení
včetně vzdělávacích projektů jako je tento
www.cssfg.org
www.4n6gen.org
stanovení genotypu několika (8-15) vysoce polymorfních lokusů,
tím vzniká sestava zvaná GENETICKÝ PROFIL
při identifikaci nemluvíme o JISTOTĚ, ale o PRAVDĚPODOBNOSTI
HRANIČÍCÍ S JISTOTOU
posouzení biologických příbuzenských vztahů se děje porovnáním
pozorované míry shody dvou profilů s očekávanou mírou shody za
platnosti dané hypotézy
existují i analýzy identifikující „do skupiny“, nikoli až na úroveň
jednotlivce (analýza mtDNA, haplotypizace Y-chromozómu…)
hovoříme-li o individuu, musíme vždy vyjasnit, z jakého úhlu pohledu
GENETA je individuum genetické, je to soubor všech buněk vzniklých z
jedné zygoty
RAMETA je individuum fyzické, prostorová a funkční jednotka
„PSYCHETA“ je jedinec psychický, osobnost vědomá si vlastního „já“
„JUSTETA“??? 
13
1.4.2010
jednovaječná X-čata (1 geneta = více ramet)
heteropaternální superfekundace u fraternálních dvojčat
vrozený chimérismus (1 rameta = více genet)
fetální a maternální mikrochimérismus (vzájemná směna buněk
matky a plodu)
chimérismus fraternálních dvojčat
dočasný (?) chimérismus po transfúzích
trvalý chimérismus po allotransplantacích
zvýšení frekvence fraternálních vícerčat u IVF
předpokládané (nedoložené) zvýšení frekvence chimérismu u IVF
14