BSF_D-DDI-W23-500 D-Dimer _CS_ REV4_0 11082014

ÚČEL POUŽITÍ
Kazeta test DIMA® na D-dimer je imunochromatografický rychlý test pro
kvalitativní zjištění D-dimeru v plazmě nebo plné krvi. Tato souprava je určena
jako pomůcka pro vyloučení diagnózy diseminované intravaskulární koagulace
(DIC), hluboké žilní trombózy (DVT) a plicní embolie (PE). Vyhrazeno pro
odbornou lékařskou diagnózu in vitro.
SOUHRN
Testování D-dimeru bylo původně zavedeno za účelem diagnostikování
diseminované intravaskulární koagulace (DIC). V 90. letech minulého století se
ukázalo, že je to rovněž vhodný nástroj diagnózy tromboembolického procesu.
D-dimer je produkt degradace fibrinu, malý bílkovinný fragment vyskytující se v
krvi po degradaci krevní sraženiny fibrinolýzou. Během srážení krve je
fibrinogen metabolizován na fibrin aktivací trombinů. Fibrin se skládá z
jednotek D a E. Štěpení fibrinu vede ke vzniku tzv. D-dimerů.
Krevním testem lze určit koncentraci D-dimeru na podporu diagnostikování
trombózy. Od svého zavedení do praxe v 90. letech 20. století je tento test
významnou součástí vyšetření pacientů s podezřením na trombózu. Zatímco
negativní výsledek testu prakticky existenci trombózy vylučuje, pozitivní test
může indikovat trombózu, ale nevylučuje ani jiné potenciální etiologie. Používá
se především na vyloučení tromboembolické choroby, kde je její
pravděpodobnost nízká.
Testování na D-dimer je klinicky užitečné v případě podezření na hlubokou
žilní trombózu (DVT) nebo plicní embolii (PE). Také u pacientů s podezřením
na diseminovanou intravaskulární koagulaci (DIC) může testování koncentrace
D-dimeru napomoci při stanovení diagnózy.
PRINCIP
Kazeta test DIMA® na D-dimer je určen k použití pro detekci přítomnosti Ddimeru v plazmě nebo v plné krvi.
Kazeta test DIMA® na D-dimer je určen ke zjišťování D-dimeru v plazmě a v
plné krvi prostřednictvím vizuální interpretace vytvořených barevných linií
(proužků) na kazetě. Jedná se o sendvičový imunologický test. Membrána
kazety je napuštěna protilátkou D-dimeru v testovací zóně (T). Během testu
reaguje zředěný vzorek s obarveným konjugátem (zlatý konjugát protilátky proti
D-dimeru), který byl nanesen na podložku uvnitř testovací kazety. Směs se pak
chromatograficky pohybuje na membráně vzlínáním. Pokud je ve vzorku
přítomen D-dimer, vytvoří se v testovací zóně (T) membrány barevný proužek ,
tvořený specifickou sloučeninou protilátky-antigenu-konjugátu.
Tento komplex obsahuje obarvenou protilátku proti D-dimeru, D-dimer ze
vzorku a protilátku znehybněnou na membráně v její testovací zóně (T).
Na druhé straně tento barevný proužek se vždy objeví v kontrolní zóně (C).
Kontrolní proužek slouží jako ukazatel řádné funkce kazety. Ukazuje, že test
proběhl správně a požadovaná reakce na membráně nastala.
Vznik obarvení v testovací zóně membrány (T) označuje pozitivní výsledek
testu a nepřítomnost obarvení v testovací zóně (T) označuje negativní
výsledek.
REAGENCIE
Testovací kazety obsahují signalizační částice potažené protilátkami proti Ddimeru i protilátky proti D-dimeru umístěné na membráně.
PREVENTIVNÍ OPATŘENÍ
• Jen pro profesionální diagnostiku in vitro
• Jen pro jednorázové použití
• Složky testovací sady nezmrazujte
• Testovací složky nepoužívejte po uvedené exspirační době (viz fóliový
sáček a etiketa na kartonu)
• Test nepoužívejte, je-li sáček poškozen
• Tam, kde se používají zkušební vzorky a testovací sady, nejezte, nepijte a
nekuřte
• Se všemi vzorky zacházejte tak, jako by obsahovaly infekční materiál
• Během celého testu dodržujte stávající preventivní opatření pro
mikrobiologická rizika i standardní postup ke správné likvidaci vzorků
• Při manipulaci se zkušebními vzorky noste ochrannou výstroj, jako je
laboratorní plášť, jednorázové rukavice a ochranné brýle
• Použitý test byste měli odstranit podle místních předpisů
• Vlhkost a vysoké teploty mohou ovlivnit výsledky testů
• Zředěný roztok obsahuje malá množství azidu sodného (0,09 %)
• Nepoužívejte více reagenčních kapalin, než je potřebné
• Všechny reagencie musí mít před použitím pokojovou teplotu (15-30 °C)
• Do reakční zóny neaplikujte kapalný vzorek
1
• Nedotýkejte se reakční zóny, aby nedošlo ke kontaminaci
• Testovací kazety by měly až do použití zůstat v uzavřeném fóliovém sáčku
• Po 10 minutách test vyhodnoťte. Po více než 15 minutách už je pozdě k
vyhodnocení výsledků
• Testovací sadu skladujte a přepravujte při teplotě 2-30 °C
• Křížové kontaminaci různých vzorků zabráníte tím, že pro každý vzorek
vezmete novou pipetu
• PBS pufr obsahuje azid sodný, který může reagovat s olovem nebo mědí a
tvoří potenciálně explozivní kovové azidy. Jestliže pracujete s roztokem
nebo extrahovaným vzorkem, vždy vylévejte s velkým množstvím vody,
abyste zabránili vytvoření azidů
• Potenciálně infekční materiály (např. protilátky) nebo jiné látky testu (např.
chemikálie) nejsou při správném zacházení podle návodu nebezpečné
• Tato souprava obsahuje produkty živočišného původu. I při certifikované
znalosti původu a / nebo zdravotního stavu zvířat nelze zcela zaručit
nepřítomnost patogenních agens. Doporučuje se proto, aby tyto produkty
byly považovány za potenciálně infekční a dodržela se obvyklá
bezpečnostní opatření (např. varování před požitím nebo inhalací).
SKLADOVÁNÍ A TRVANLIVOST
Testovací sadu uchovávejte při teplotě 2-30 °C. Test spotřebujte do data
expirace natištěném na fóliovém sáčku a etiketě kartonu. Test až do použití
ponechejte v uzavřeném fóliovém sáčku. Nemrazit.
MATERIÁLY
Dodané materiály
• Jednotlivě balené testovací kazety
• Pipety na jedno použití (v sáčku)
• Lancety
• Láhev s ředícím pufrem (PBS obsahujícím 0,09 % NaN3)
• Návod k použití
Potřebné materiály, které nejsou součástí balení
• Nádoba na odběr vzorků
• Stopky
ODBĚR VZORKŮ A PŘÍPRAVA
• Kazeta test DIMA® na D-dimer (plná krev/ plazma) lze provést za použití plné
krve (z venepunkce nebo z prstu), plné krve přidáno s citrátem nebo EDTA
a nebo za použití plazmy.
• Plazmu oddělte od krve co nejdříve, abyste zamezili hemolýze. Proti srážení
je nejlépe používat citrát nebo EDTA. Používejte jen čiré vzorky,
nezasažené hemolýzou.
• Test by měl proběhnout ihned po odebrání vzorku. Vzorky nenechávejte
delší dobu ležet při pokojové teplotě.
• D-dimery jsou velmi nestabilní molekuly. Vzorky plné krve a plazmy můžete
skladovat při pokojové teplotě maximálně 8 hodin a v lednici (4 °C)
maximálně 1 den.
• Před testováním přemístěte vzorek do místnosti s pokojovou teplotou (1530°C).
• Pokud mají být vzorky převáženy, zabalte je v souladu se všemi platnými
předpisy pro přepravu biologického materiálu.
PROVEDENÍ TESTU
Testovací kazeta, pufr a vzorky krve pacientů by měly být před testováním
přesunuty do místnosti s pokojovou teplotou (20-30 °C). Obaly otevírejte až
těsně před provedením testu.
1. Testovací kazetu vyjměte z fóliového sáčku a co nejdříve jej použijte,
nejpozději do 1 hodiny. Nejlepších výsledků dosáhnete, pokud test
provedete okamžitě po otevření fóliového sáčku. Test označte
identifikačními údaji pacienta nebo kontroly.
2. Nejprve přidejte do nádobky na vzorek 2 kapky plné krve nebo 1 kapku
plazmy
(pomocí
pipety
dodané v soupravě) a pak
teprve přidejte 1 kapku pufru
na zředění. Přitom zabraňte
přítomnosti
vzduchových
bublin
v
aplikovaném
vzorku (S) a do reakční
zóny nedávejte žádnou kapalinu. Spusťte stopky.
Po 10 minutách
nevyhodnocujte.
odečtěte
výsledek.
Výsledek
po
15
minutách
již
VYHODNOCENÍ TESTU
POZITIVNÍ VÝSLEDEK: Objeví se 2 linie. Jedna linie se
objeví v oblasti kontrolní zóny (C) a druhá v oblasti testovací
zóny (T). Pozitivní výsledek indikuje zvýšenou koncentraci Ddimeru.
UPOZORNĚNÍ: Intenzita barvy linie (T) je více či méně
výrazná podle koncentrace D-dimeru ve vzorku. Proto jakýkoli
odstín barevného proužku v testovací zóně (T) by měl být
považován za pozitivní.
Diagnostická citlivost a specificita
Diagnostická citlivost a specificita byla zjištěna proti stanovení Roche Tinaquant® D-dimer Assay a vedla k následujícím výsledkům:
NEGATIVNÍ VÝSLEDEK: Linie se objeví pouze v oblasti
kontrolní (C). V oblasti testovací zóny (T) se neobjeví žádná
linie. Negativní výsledek ukazuje, že se ve zkušebním vzorku
nenachází D-dimer nebo leží pod hranicí detekce testu.
NEPLATNÝ VÝSLEDEK: Kontrolní linie se neobjeví.
Nejpravděpodobnější příčinou toho, že se neobjevila kontrolní
linie je nedostatečné množství vzorku, prošlé testy nebo
chybný postup. Zkontrolujte provedení testu a test zopakujte.
Pokud problém přetrvává, sadu ihned přestaňte používat a
kontaktujte lokálního distributora.
KONTROLA KVALITY
Interní kontrola kvality
Test obsahuje interní kontrolu správného provedení. Červená linie, která se
objeví v oblasti kontrolní zóny (C), se považuje za interní kontrolu . Potvrzuje,
že bylo naneseno dostatečné množství vzorku a indikuje, že je zvlhčení
membrány dostatečné a postup byl správný.
Externí kontrola kvality
Pro každou testovací sadu se doporučuje použít pozitivní a negativní externí
kontrolu, kromě toho je to nutné z hlediska vašich interních laboratorních
postupů. Testovací souprava neobsahuje prvky externích kontrol. Testovací
souprava neobsahuje prvky externích kontrol.
OČEKÁVANÉ HODNOTY
Zvýšené hodnoty koncentrace D-dimeru nad všeobecně uznávanou limitní
hodnotou 500 ng/ml FEU (fibrinogenového ekvivalentu) jsou známkou aktivní
fibrinolýzy a byly ověřeny u pacientů trpících diseminovanou intravaskulární
koagulací (DIC), hlubokou žilní trombózou (DVT) a plicní embolií. Tyto zvýšené
koncentrace lze také zjistit po operaci nebo po úrazu a při výskytu anémie
srpkovitých erytrocytů, choroby jater, těžké infekce, sepse, zánětu, zhoubného
nádoru nebo u starších lidí. Koncentrace D-dimeru se také zvyšuje během
běžného těhotenství.
OMEZENÍ
• Negativní výsledek testu znamená s velkou pravděpodobností vyloučení
diseminované intravaskulární koagulace (DIC), hluboké žilní trombózy (DVT)
a plicní embolie (PE).1,2
• Jako v případě jakékoliv jiné diagnostické procedury je nutno výsledky
tohoto testu interpretovat ve spojení s dalšími dostupnými informacemi,
které má lékař k dispozici, jako je „Wellsovo skóre“ pro DVT nebo PE.
Zejména v rámci diagnózy DIC se výsledek testu na D-dimer používá pro
určení tzv. „DIC skóre“.1
• Citlivost rychlých imunologických testů je nižší (negativní prediktivní hodnota
= 85,7 %) u pacientů se střední nebo vysokou pravděpodobností
tromboembolického infarktu (vysoké Wellsovo skóre) než u pacientů s malou
pravděpodobností této choroby (nízké Wellsovo skóre, negativní prediktivní
hodnota = 99,5 %). Proto se pro pacienty s vysokou pravděpodobností
výskytu této choroby doporučuje ultrazvukové vyšetření bez ohledu na
výsledek rychlého testu.3
• Falešně negativní výsledek může nastat, pokud je vzorek odebrán buď příliš
brzy po vzniku trombu, nebo pokud je test o několik dní opožděn nebo
pokud byl vzorek odebrán příliš pozdě po výskytu tromboembolického
infarktu, protože koncentrace D-dimeru se může snížit už po týdnu na
normální hodnotu. Kromě toho může k negativnímu výsledku testu vést
léčba antikoagulanty před odběrem vzorku, protože tato léčba zabraňuje
zvětšování trombu.1,4
• Zvýšené hodnoty koncentrace D-dimeru po léčbě antikoagulanty ukazují na
pokračující riziko trombózy.5
• Pozitivní výsledek není však důkazem výskytu výše zmíněných chorob.
Falešně pozitivní výsledky mohou být způsobeny různými příčinami:
chorobou jater, zánětem, zhoubným nádorem, úrazem, těhotenstvím,
nedávnou operací stejně tak jako pokročilým věkem.1,2
• Je možné, že v testu nevyjde žádný výsledek, pokud bude vzorek plné krve
příliš viskózní nebo pokud byl vzorek skladován déle než jeden den. V tomto
případě je nutno test opakovat s novou soupravou a novým vzorkem
odebraným témuž pacientovi.
VÝKONOVÉ CHARAKTERISTIKY
Analytická citlivost
Analytická citlivost (hranice detekce) kazetového testu na D-dimer je 500 ng/ml
FEU (fibrinogenového ekvivalentu). Toto je hodnota indikující pozitivní
výsledek testu.
Analytická specificita
Následující látky s tímto testem neinterferují: bilirubin po hladinu 0,2 g/l, lipidy
(celkové) po hladinu 15 g/l (s asi 6 g/l celkového cholesterolu a 4,5 g/l
triglyceridů), sérový protein (celkový) po hladinu 100 g/l (s asi 55 g/l albuminu a
35 g/l imunoglobulinu), hemoglobin po hladinu 1 g/l, revmatický faktor po
hladinu 200 IU/ml.
2
Kazeta test DIMA® na
D-dimer
Roche
Tina-quant®
D-dimer
Assay
pozitivní
negativní
Pozitivní
89
1
90
Negativní
5
62
67
Celkem
94
63
157
Diagnostická citlivost:
Diagnostická specificita:
Celkem
98.9%
92.5%
Přesnost
Přesnost měření byla srovnávána a ověřována proti Roche Tina-quant®
D-dimer Assay. Vypočtená přesnost byla 96.2%.
Přesnost v rámci testu
Přesnost testu byla určena v rámci stejné šarže (variabilita v rámci šarže) a
mezi různými šaržemi (celková variabilita v rámci testu) kontrolními roztoky.
Kontroly s koncentrací D-dimeru 0 ng/ml vedly k negativním výsledkům testu.
Kontroly s koncentrací D-dimeru 500 ng/ml vedly k pozitivním výsledkům.
LITERATURA
1. Dempfle, Carl-Erik (2005): Bestimmung des D-dimer-Antigens in der
klinischen Routine, Deutsches Ärzteblatt Jg. 102, Heft 7, 18. Februar 2005:
A428-A432.
2. Fritscher, Claudia (2007): Bedeutung der D-dimer Untersuchung in der
Diagnostik der tiefen Beinvenenthrombose, Labor Aktuell Nr.7/2007, 1-8.
3. Brill-Edwards P., Lee A. (1999): D-dimer testing in the diagnosis of acute
venous thromboembolism, Thrombosis and Haemostasis; 82(2): 688-94
4. Blackwell Publishing Ltd. (2004): The diagnosis of deep vein thrombosis in
symptomatic outpatients and the potential for clinical assessment and Ddimer assays to reduce the need for diagnostic imaging, British Journal of
Haematology, 124, 15–25.
5. Thomas, Lothar (2008): Labor und Diagnose (Indikation und Bewertung von
Laborfunden
für
die
medizinischen
Diagnostik,
TH-Books
Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt/Main, 7.Auflage, 2008.
VYSVĚTLENÍ SYMBOLŮ
Diagnostický zdravotnický
prostředek in vitro
Pro jednorázové použití
Dostačuje pro
Spotřebujte do
Kód šarže
Výrobce
+30°C
+2°C
Teplotní omezení
Viz návod k použití
Rev.:4.0 – (CS) – 26/08/2014 (LET)
Dovozce pro ČR a SR: DOT®diagnostics, s.r.o.
Ruzyňská 519/16; CZ - 161 00 Praha 6
Tel.: +420 235 318 612; Fax: +420 235 18 614
e-mail: [email protected] / www.dotdiag.cz
Distribuce a prodej:
QUICKSEAL INTERNATIONAL, s.r.o.
Korytná 47; CZ – 100 00 Praha 10
e-mail: [email protected] / www.quickseal.eu