DIM-S23 D-dimer kazeta

• SKLADOVÁNÍ A STABILITA VZORKŮ
Jako vzorek použijte plnou krev odebranou z prstu nebo ze
žíly nebo plasmu.
Plasma by měla být oddělena co nejdříve po odběru.
Hemolytické vzorky nepoužívejte.
Test proveďte co nejdříve po odběru.
Odebrané vzorky krve nenechávejte stát dlouho při pokojové
teplotě.
D-dimer má velmi nestabilní molekulu. Vzorek krve nebo
plasmy může být uchováván při pokojové teplotě pouze 8
hodin, v chladničce 1 den.
Před provedením testu vzorek vytemperujte.
• POSTUP STANOVENÍ
D-DIMER
Kazeta pro rychlý imunochemický kvalitativní průkaz D-dimerů
v plasmě nebo plné krvi.
• KAT. Č. / VEL. BAL.
Kat. č.
Vel. bal.
DDI-S23
20 ks kazet jednotlivě balených,
20 ks pipet
1 lahvička s dilučním pufrem (PBS,
obsahuje 0,09% azidu sodného)
Všechny komponenty nechte vytemperovat.
1.
Vyndejte kazetu z obalu a označte ji jménem pacienta.
2.
Do jamky označené S kápněte 2 kapky plné krve nebo 1
kapku plasmy a pak přidejte 1 kapku dilučního pufru.
Dejte pozor, aby se do testační zóny nedostala žádná
tekutina.
3.
Stiskněte stopky!
4.
Po 10 minutách odečtěte výsledek.
5.
Výsledek testu odečtený po 15 minutách není
směrodatný.
Po 10 minutách
odečtěte
výsledek.
Výsledek testu
odečtený po 15
minutách není
směrodatný.
negativní
pozitivní
neplatný
1 návod k použití
• KLINICKÝ VÝZNAM
D-dimer test byl speciálně vyvinut pro diagnostiku DIC
(disseminované intravaskulární koagulace). V 90. letech bylo
zjištěno, že tento test je užitečný i při diagnostice
tromboembolie.
D-dimer je degradační produkt fibrinu, malý bílkovinný
fragment přítomný v krvi po rozpuštění krevního koagula
v průběhu fibrinolýzy. Při srážení krve je fibrinogen
metabolizován na fibrin aktivací trombinu. Fibrin se skládá z D
a E jednotek. Test může napomoci v diagnostice trombózy.
• PRINCIP
Do jamky označené S kápněte 2 kapky
plné krve nebo 1 kapku plasmy a pak
přidejte 1 kapku dilučního pufru. Dejte
pozor, aby se do testační zóny nedostala
žádná tekutina.
• INTERPRETACE VÝSLEDKU
Negativní výsledek:
1 barevná linka v kontrolní zóně (C).
Žádná linka v zóně T
D-dimer imunochromatografický test je určen pro detekci Ddimeru v plasmě nebo plné krvi. Jedná se o sandwichovou
metodu. Membrána v testační zóně (T) je potažena protilátkou
proti D-dimeru. Vzorek ředěný pufrem postupuje z místa
nanesení a reaguje s barevným konjugátem (zlato+anti-Ddimer protilátka), který je nanesen uvnitř kazety. Pokud jsou
ve vzorku přítomny D-dimery, dochází ke tvorbě barevné linky
(proužku) v zóně T. Proužek vznikne reakcí barevné protilátky
proti D-dimeru, D-dimeru ze vzorku a immobilizované
protilátky, kterou je potažena membrána. V kontrolní zóně (C)
je obsažena jiná protilátka (myší) a vzniká zde barevná linie,
která potvrzuje funkčnost kazety a správné provedení testu.
Pozitivní výsledek:
2 barevné linky- jedna v kontrolní zóně
C,
jedna v testační zóně T.
Intenzita barevé linky v zóně T je různá
Neplatný výsledek:
Kontrolní proužek
Viditelný u všech správně
provedených testů.
Proužek v zóně testu (T)
Viditelný pouze u pozitivních testů.
Jamka pro nanesení vzorku
Žádná linka v kontrolní zóně (C)
znamená znehodnocení testu. Výsledek je
neplatný a je nutné vyšetření opakovat s
novou kazetou a postupovat přesně podle
návodu.
• KONTROLA KVALITY
• SKLADOVÁNÍ A STABILITA REAGENTŮ
Skladování:
2 – 30°C
Stabilita:
Kazeta uzavřená v originálním obalu do data
exspirace.
Po otevření obalu musí být kazeta ihned
použita.
Každá kazeta má kontrolní zónu- vznik barevné linky v zóně
C ukazuje na správné provedení testu.
SLP (správná laboratorní praxe) doporučuje kontrolu pomocí
kontrolního materiálu.
09/2009 ver.01
• OČEKÁVANÉ VÝSLEDKY
Zvýšená koncentrace D-dimerů je známkou aktivní fibrinolýzy a
byla potvrzena u pacientů s DIC (disseminovanou
intravaskulární koagulací), hlubokou žilní trombózou a plicní
embolií. Vyšší koncentraci můžeme najít i po operaci a při
onemocnění jater, těžkých infekcích, sepsi, maligních
onemocněních, srpkovité anémii a ve vysokém věku. I při
normálním průběhu gravidity mohou být D-dimery pozitivní.
Cut off: 80 ng/ml. Tato koncentrace dává pozitivní výsledek.
• OMEZENÍ
1)
2)
3)
4)
5)
6)
7)
Negativní výsledek vylučuje DIC, hlubokou žilní
trombózu a embolii do plicnice s pravděpodobností 99%.
Pozitivní výsledek ale nepotvrzuje přítomnost výše
uvedených patologických stavů. Např. u hluboké žilní
trombózy jsou D-dimery pozitivní pouze krátce po jejím
vzniku, asi po týdnu jsou již negativní.
Výsledek testu je nutné hodnotit spolu s dalšími údaji,
které má lékař k dispozici, např. výsledky dalších
vyšetření.
Může nastat situace, že test neposkytne žádný výsledek,
např. pokud je viskozita vzorku příliš vysoká, nebo byla
odebraná plná krev skladována déle než 1 den. V tomto
případě doporučuje výrobce opakovat test s novou
kazetou a čerstvě odebraným vzorkem.
Falešně pozitivní výsledek může mít různé příčiny:
onemocnění jater, záněty, úrazy, těhotenství, nádorová
onemocnění, pokročilý věk či chirurgický zákrok
provedený před krátkým časem.
Falešně negativní výsledek můžeme dostat jednak u
právě vzniklé trombózy, ale i u trombózy, která již trvá
několik dní. Také léčba antikoagulačními farmaky před
odběrem vzorku může být příčinou falešně negativního
výsledku.
Pokud i po antikoagulační léčbě přetrvává pozitivní
výsledek, je to známkou vysokého rizika vzniku
opakované trombózy.
• CHARAKTERISTIKA TESTU
Přesnost:
Byla ověřena slepým testem s kontrolními vzorky o koncentraci
D-dimeru 0 ng/ml, bylo dosaženo vždy negativního výsledku.
Kontrola s hladinou D-dimeru 150ng/ml dávala vždy pozitivní
výsledky.
Reprodukovatelnost:
Byla potvrzena slepým testem provedeným v různých dnech.
Všechny vzorky s nulovou koncentrací D-dimeru byly negativní.
Všechny testy s koncentrací 150ng/ml dávaly pozitivní
výsledky.
Správnost:
Správnost byla porovnána a ověřena s komerčně dostupným
testem ( tento test byl validován proti ELISA testu, DIMERTEST
GOLD EIA) s koncentrací 80ng/ml. Výsledky obou testů byly ve
100% shodné.
• POZNÁMKY
-
-
pouze pro profesionální použití in vitro
před provedením testu si přečtěte pečlivě návod
nepoužívejte proexpirované soupravy
nepoužívejte kazetu, pokud má poškozený obal, test je
citlivý na přítomnost vlhkosti
neotvírejte kazetu, pokud ji nebudete používat
kazetu lze použít pouze jednou
při provádění testu nepijte, nejezte a nekuřte
se vzorky krve nakládejte jako s potenciálně infekčním
materiálem a dodržujte bezpečnostní předpisy platné ve
vašem zdravotnickém zařízení
diluční pufr obsahuje minimální množství azidu sodného
(0,09%)
nepipetujte reagent ústy!
Dbejte, aby se do testační zóny nedostala žádná
tekutina
Nedotýkejte se testační zóny na kazetě, mohlo by dojít
ke kontaminaci
Při práci používejte ochranné rukavice, event. další
pomůcky v souladu s Vašimi předpisy
Uchovávejte test při doporučené teplotě 2-30ºC .
Vlhkost a vysoká teplota může vést ke zkreslení
výsledku
• LITERATURA
1.
2.
3.
4.
Dempfle, Carl-Erik (2005): Bestimmung des D-dimerAntigens in der klinischen Routine, Deutsches Ärzteblatt
Jg. 102, Heft 7, 18. Februar 2005: A428-A432.
Fritscher, Claudia (2007): Bedeutung der D-dimer
Untersuchung
in
der
Diagnostik
der
tiefen
Beinvenenthrombose, Labor Aktuell Nr.7/2007, 1-8.
Blackwell Publishing Ltd. (2004): The diagnosis of deep
vein thrombosis in symptomatic outpatients and the
potential for clinical assessment and D-dimer assays to
reduce the need for diagnostic imaging, British Journal of
Haematology, 124, 15–25.
Thomas, Lothar (2008): Labor und Diagnose (Indikation
und
Bewertung von Laborfunden für die medizinischen
Diagnostik,
TH-Books
Verlagsgesellschaft
mbH,
Frankfurt/Main, 7.Auflage, 2008.
Šarže
Exspirace
Pouze pro použití in vitro
Skladovat při pokojové teplotě
Pouze pro jednorázové použití
Specificita:
Žádná interference nebyla nalezena u bilirubinu do 0,2g/l,
lipidů do 30ng/l, sérových bílkovin do 50g/l, gamaglobulinu a
hemoglobinu do 1g/l.
Studie u pacientů s revmatoidní arthritidou prokázala, že
neexistuje zkřížená reaktivita pro revmatoidní faktor.
DIMA Gesselschaft für Diagnostika mbH
Robert Bosch Breite 23
Göttingen
Germany
Distibutor v ČR a SR:
DOT®diagnostics, s.r.o.
Ruzyňská 519/16
CZ - 161 00 Praha 6
Tel.: +420 235 318 612
Fax: +420 235 318 614
e-mail: [email protected]
09/2009 ver.01